nordicmubio 10020500说明书

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小鼠抗双链 RNA (K1)

货号:10020500

克隆 K1
同种型 IgG2a κ
产品类别 单克隆抗体 
单位 500 微克
主持人 老鼠
应用 ELISA 
流式细胞术 
免疫亲和层析 
免疫印迹 
免疫细胞
化学免疫 组织化学 

背景 
在过去十年中,我们的双链 RNA (dsRNA) 抗体已被广泛用于检测和表征具有 dsRNA 基因组或中间体的动植物病毒。此外,抗 dsRNA 抗体可用作检测病原体的诊断工具,包括在石蜡包埋的固定组织样本中进行检测(Richardson 等人,2010 年)。K1 单克隆抗体以与我们广泛使用的 J2 抗体相似的亲和力识别 dsRNA。可用于细胞和组织中dsRNA的组织学和细胞学检测。事实证明,在 J2 不能提供令人满意的结果的那些罕见的实验设置中,它作为 J2 的替代品特别有用,以解决交叉反应和/或去除不需要的背景。K1 可用于检测多种病毒的 dsRNA 中间体,如肝炎病毒、泰勒氏鼠脑脊髓炎病毒或日本脑炎病毒。它用于检测培养细胞和固定石蜡包埋的组织学样品中的 dsRNA(参见出版物)。如果需要检测 Poly I:C,我们会高度使用 K1 而不是 J2,因为 K1 对这种合成的聚核糖核苷酸具有更高的亲和力(参见 Schönborn 等,1991,图 2)。K1 已成功用于免疫荧光显微镜、流式细胞术 (FACS) 和免疫捕获方法(如斑点印迹和 ELISA)。我们需要高度使用 K1 而不是 J2 来检测 C,因为 K1 对这种合成的多核糖核苷酸具有更高的亲和力(参见 Schönborn 等,1991,图 2)。K1 已成功用于免疫荧光显微镜、流式细胞术 (FACS) 和免疫捕获方法(如斑点印迹和 ELISA)。我们需要高度使用 K1 而不是 J2 来检测 C,因为 K1 对这种合成的多核糖核苷酸具有更高的亲和力(参见 Schönborn 等,1991,图 2)。K1 已成功用于免疫荧光显微镜、流式细胞术 (FACS) 和免疫捕获方法(如斑点印迹和 ELISA)。

同义词: Mouse anti dsRNA

来源 
雌性 DBA/2 小鼠腹膜内注射 50 ug L-dsRNA 和 75 ug 甲基化牛血清白蛋白的混合物,在*弗氏佐剂中乳化。在几次加强后,脾细胞与 Sp2/0-Agl4 骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤克隆。

产品 
mAb K1 可识别双链 RNA (dsRNA),前提是螺旋长度大于或等于 40 bp。dsRNA 识别与抗原的序列和核苷酸组成无关。迄今为止研究的所有天然存在的 dsRNA(40-50 种)以及 poly(I).poly(C) 和 poly(A).poly(U) 都已被 K1 识别。正如 Schönborn 等人所述。K1 对 poly(I).poly(C) 的亲和力高于对其他 dsRNA 抗原的亲和力,尽管表观结合常数的差异在不同的实验条件下可能会有所不同。

配方: 冻干样品应使用 500 µl 无菌蒸馏水复溶。然后将 mAb 以 1 mgr/ml 的浓度存在于不含任何稳定剂或防腐剂的 PBS 中。作为冻干程序的结果,重建的抗体可能含有少量聚集体形式的变性蛋白质,这可能会干扰某些应用,例如免疫组织化学(例如,通过提供高背景)。因此,我们强烈建议在使用和使用上清液之前对重组的抗体进行离心(微量离心)。

纯化方法: A蛋白-琼脂糖亲和层析。

纯度: 凝胶电泳纯 IgG 抗体。

浓度: 重构后的浓度:通过 A280 nm 确定为 1.00 mg/ml(A280 nm = 1.47 对应于 1 mg/ml 抗体)。

应用 
MAb K1 可用于 ELISA、dsRNA 免疫印迹、免疫亲和层析,在某些系统中还可用于免疫组织化学(参见参考资料)。对于任何特定应用,抗体的最佳工作稀释度应通过滴定确定。请注意,dsRNA 免疫印迹之前的核酸分离必须通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行,因为从琼脂糖凝胶印迹后检测的灵敏度要低得多。不得用于临床目的。仅供体外使用。

储存 
重构后的抗体应分装并储存在 -20 °C 或 -70 °C。加入 10 mM 叠氮化纳后,未稀释的抗体也可以在 +4 °C 下短时间保存。对于长期储存,mAb 应保持冷冻。应避免重复冷冻/解冻循环。当保持冻干时,产品在 -20°C 或 -70°C 下可保持稳定 10 年。

运输条件: 在环境温度下运输。

注意 
本产品仅供研究和体外测试使用,不适用于涉及人类或动物的诊断或治疗程序。它可能含有危险成分。请参阅安全数据表 (SDS) 了解更多信息和正确处理程序。根据当地法规处理产品残余物。本数据表在合理范围内尽可能准确,但 Exalpha Biologicals 对本信息中的任何不准确或遗漏不承担任何责任。

参考 
1) Schönborn, J.、Oberstrass, J.、Breyel, E.、Tittgen, J.、Schumacher, J. 和 Lukacs, N. (1991) 双链 RNA 的单克隆抗体作为粗核酸中 RNA 结构的探针提取物。核酸研究 19,2993-3000。2) Lukacs, N. (1994) 通过双链 RNA 的单克隆抗体检测植物中的病毒感染和区分共存病毒。J. 维罗尔。方法 47, 255-272。3) Lukacs, N. (1997) 通过结构特异性抗 RNA 抗体检测有义:反义双链体。在:反义技术。实用方法,C. Lichtenstein 和 W. Nellen(编辑),第 281-295 页。IRL 出版社,牛津。4) SJ Richardson、A. Willcox、DA Hilton、S. Tauriainen、H. Hyoty、AJ Bone、AK Foulis、NG Morgan。使用针对 dsRNA 的抗血清检测福尔马林固定石蜡包埋组织中的病毒感染。J 临床病毒。(2010) 49(3); 180-5。doi:10.1016/j.jcv.2010.07.015。

SKU: 10020500 分类: 一抗, 一抗, 单克隆抗体
图 1. K1 抗体用于检测经 poly I:C 处理的 MEF 中的 dsRNA(下图)。dsRNA 的存在伴随着 eIF2a 的磷酸化,从而导致蛋白质合成停滞(上图)。图取自 Clavarino 等人 (2012) P