matrixome层粘连蛋白511E8片段说明书
Laminin-511 是基底膜的主要成分,可作为多能干细胞(ES/iPS 细胞)的支架。
作为基底膜的一部分,层粘连蛋白 511 (800 kDa) 与细胞表面的整合素结合。
Laminin-511 是一种非常大的蛋白质 (800 kDa),由三条链(α-、β-和 γ- 链)组成,并形成超分子聚集体。很难作为重组蛋白生产。
当我们将 Laminin-511 片段化并在细胞表面寻找与整合素结合的最小成分时,我们确定了称为 Laminin-511 E8 片段 (150 kDa) 的成分。我们决定将该成分作为重组蛋白生产。
与“Laminin-511 (Intact)”相比,人类 iPS 细胞对 Laminin-511E8 片段的粘附更强。
与“Laminin-511 (Intact)”相比,人类 iPS 细胞对 Laminin-511 E8 片段的粘附更强。
比较了层粘连蛋白 511 E8 片段和其他底物的细胞附着。
吸光度 (OD570) 表示相对于对 Matrigel 的最大影响值进行归一化的附着细胞的相对数量,该值被任意设置为 1。
该结果证实层粘连蛋白-511 E8 片段强烈地粘附于细胞。
单个人类 ES 细胞迅速附着在 Laminin-511E8 片段上并增殖。
分散的人单个 ES 细胞迅速粘附在 Laminin-511 E8 片段上并立即增殖。
我们在层粘连蛋白 511 E8 片段和其他细胞培养基质上传代人 ES 细胞。
传代时单个人 ES 细胞集落证实 Laminin-511 E8 片段迅速粘附在细胞上并增殖。
在 ES/iPS 细胞培养中使用 Laminin-511E8 片段的更多优势
使用传统的培养方法,如果 ES/iPS 细胞分散成单个细胞,细胞就会死亡。
因此,在传代时,一定程度上需要维持一个细胞集落。
使用 Laminin-511 E8 片段作为细胞培养基质,甚至可以维持和培养单个 ES/iPS。
-> 减少学习细胞培养方法所需的时间。
-> 细胞培养的延伸效率显着提高。
使用 Laminin-511E8 片段生长 ES/iPS 细胞
*5天
*菌落传代方法
传统的培养方法(菌落传代)传代时的延伸效率为1:4,而使用Laminin-511 E8片段作为细胞培养基质时,延伸率为1:100。
使用 Laminin-511E8 片段批量生产 ES/iPS 细胞培养物
我们比较了传统方法(菌落法)培养30天的ES/iPS细胞数量和使用Laminin-511 E8片段作为细胞培养基质培养的ES/iPS细胞数量。图表的横轴表示培养天数,纵轴表示细胞数。
结果证实,与传统方法(菌落法)相比,使用Laminin-511 E8片段的细胞数增加了200或更多。