核糖核酸酶H

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上海金畔生物科技有限公司提供核糖核酸酶H ，欢迎访问官网了解更多产品信息。

产品编号 C6108
英文名称 RNase H
中文名称 核糖核酸酶H
别    名 Ribonuclease H; RnaseH;   RNA酶H;
保存条件 -20˚C，有效期24个月
注意事项 This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍 产品简介：
核糖核酸酶H (RNase H) 是一种核酸内切酶，可特异性地水解与DNA杂交的RNA的磷酸二酯键，产生具有游离5’-P和3’-OH末端的产物。该酶不能降解单链核酸、双链DNA或双链RNA。用于cDNA第二链合成前去除mRNA，DNA-RNA杂交体的鉴定，在Oligo(dT) 存在下去除mRNA 的poly(A)尾。

单位定义：
1单位指50μl反应体系中，37℃条件下，20min内从40pmol 长度为25bp的RNA-DNA杂交链中水解出1nmol核酸底物所需的酶量。

产品组份：
RNase H (60 U/μl)： 10 μl
5x RNase H Buffer： 300 μl
(5 x RNase H Buffer 成分：500 mM TrisCl (pH 8.3 at 25°C)，30 mM MgCl2，750 mM KCl，100 mM DTT)

操作步骤：
1. 在一无菌离心管中配制以下反应液：
DNA-RNA杂合体： 0.5~5 μg
5x RNase H Buffer： 10 μl
RNase H (60 U/μl)： 1 μl
DEPC-ddH2O： 补足体积至50 μl
2. 30°C反应1小时。
3. 加入5 μl的3 M NaOAc (pH5.2)。
4. 加入125 μl的预冷无水乙醇，-20°C放置30~60分钟。
5. 离心回收沉淀，用预冷的70％乙醇清洗沉淀，真空干燥后备用。
注意事项：
该酶的最佳反应温度为37°C，65°C 20min使该酶失活。