intronbio IR0441071说明书
LiliF™ Canine Coronavirus Ag rapid test kit
| IR0441071 | 1 test X 10 / kit |
intronbio犬冠状病毒诊断试剂盒产品信息
背景资料
犬冠状病毒是冠状病毒科的一种病毒，它在世界范围内导致狗的高度传染性肠道疾病。它于1971年在德国哨兵犬爆发期间被发现。潜伏期为一至三天。这种疾病具有高度传染性，通过感染犬的粪便传播，感染犬通常会在病毒感染后6至9天内排出病毒，但有时会感染6个月。症状包括腹泻，呕吐和厌食症。诊断是通过检测粪便中的病毒颗粒。
LiliF CCV Ag快速试剂盒是一种侧流式免疫色谱分析试剂盒，用于快速和定性检测犬体内分泌物中的犬冠状病毒抗原。
原理
有可能的使用
• 检测犬冠状病毒
解释
套件内容
| 没有 | 内容 | 10个测试/套件 |
|---|---|---|
| 1 | 测试设备 | 10个测试 |
| 2 | FOB一次性瓶子包括样品稀释剂 | 0.5ml x 1ea |
| 3 | 棉签 | 10EA |
犬冠状病毒百科
犬冠状病毒为单胜RNA病毒，有6～7种多肽，其中4种是糖肽，不含RNA聚合酶及神经氨酸酶。犬冠状病毒(canine coronavirus，CCV)是1种严重危害养犬业、经济动物养殖业和野生动物保护的病毒性传染病病源 [1] 。可使犬发生程度不同的胃肠炎症状，特征有频繁呕吐、腹泻、沉郁、厌食等症状。本病一年四季均可发生，以冬季多发，病犬是主要的传染原，犬可通过呼吸道、消化道、粪便及污染物传染。该病一但发生，同窝犬同室犬很难控制均可造成感染。该病经常和犬细小病毒，轮状病毒及其它胃肠道疾病混合感染。幼犬死亡率较高。
中文学名
犬冠状病毒
别 称
Canine coronavirus
界
病毒界
目
网巢病毒目
科
冠状病毒科
属
冠状病毒属
种
犬冠状病毒
简介
犬 冠状 病 毒 (Caninecoronavi,l~S，CCV)属 于尼 多病 毒 目
犬冠状病毒
(Nidovirales)、冠 状 病 毒 科 (Coronaviridae)、冠状 病 毒 属 (Coronavirus)、冠 状 病 毒 I群 。CCV 由 Binn等 (1971)首先从腹泻的德国军犬中分离到的 ，病毒粒 子直 径为 60～200nm，呈球 形 ，有囊膜 。核衣壳呈细丝状 ．螺旋对称 ，像其它囊膜病毒一样。CCV 对热 、脂溶剂 、非离子去污剂 、甲醛和氧化剂敏 感 ，对酸稳定 ，在-70℃或 冻干后 在 4℃下可保存数年 。CCV 可在多种犬和猫的细 胞系中增殖 ，如原代犬肾细胞 ，犬胸腺和皮肤纤维瘤细胞 (A72)，猫肺细胞 (CRFK)等 。
犬冠状病毒(CCV)基因组为一28～ 32 kb大小的单股正链RNA,基因在病毒自身RNA聚合酶的存在下、以先导引物转录机制进行转录,不同的病毒基因组和亚基因组翻译产生除病毒依赖RNA的RNA聚合酶以外,还产生其它病毒的结构蛋白和非结构蛋白,其中有相对比较保守、参与病毒核衣壳形成、介导宿主细胞免疫的核衣壳蛋白(N);在病毒出芽、组装和成熟中起重要作用的膜蛋白(M);能刺激机体产生中和抗体,且易变异的纤突蛋白(S)，另外S蛋白还决定着病毒血清型、感染力,同时通过识别,并与病毒宿主细胞受体相互作用决定病毒感染的宿主范围;参与病毒组装的小膜蛋白(E)和其它病毒蛋白.CCV还可识别猫氨肽酶N(fAPN)并与之相互作用。 [2]
发病特点
该病多发于寒冷的冬季 ，传播迅速，数日内常成窝暴发 ；该病的发生虽无品种 、年龄、性别之分 ，但在犬群中流行时 ，通常都是幼犬先发病 ，然后波及其他年龄的犬。幼犬的发病率和致死率均高于成年犬。幼犬症状加剧，呕吐和腹泻是该病的主要症状，成年犬症状轻微 。该病的临床症状和流行病学与轮状病毒感染相似 ，而且常与轮状病毒、犬细小病毒等混合感染 ，诊断较为困难。从动物回归试验来看，病毒接种后1d就出现临床症状。所有攻毒犬扑杀后都有肠以及肠系膜淋巴结病变。但有1只犬没有可观察到的明显症状 ，原因可能是该病毒需与细菌混合感染才表现出明显的临床症状 [3] 。
犬冠状病毒病因
犬冠状病毒病是由犬冠状病毒引起的，犬冠状病毒可感染所有品种和各种年龄的狗（以幼犬受害严重），使狗产生轻重不一的胃肠炎症状，临床上出现频繁地呕吐、腹泻、沉郁、厌食，临床症状消失后14～21天仍可复发，是目前危害狗的一大传染病。感染途径是消化道，主要是由于接触了病狗排出的粪便及污染物所致。病毒在粪便里存活6～9天，污染物在水中可保持数天的传染性。犬冠状病毒可与猫传染性腹膜炎病毒和猪传染性胃肠炎病毒的抗血清发生反应，说明三者可能是一组病毒。该病毒对热、紫外线和一般的化学药品敏感。
症状
潜伏期1～8天。本病传染迅速，数日内可蔓延全群。一般先表现嗜睡、衰弱、反复呕吐，以后粪便由糊状、半糊状至水样，橙色或绿色，含黏液或血液，发烧或不发烧，白细胞减少，迅速脱水，死亡。随着日龄的增长，死亡率降低。有的病例不表现临床症状。犬冠状病毒常和细小病毒一起混合感染，构成犬腹泻大流行。
治疗
采用对症疗法，如止吐、止泻、补液，用抗生素防止继发感染，立即断食断水，冠状病毒是肠胃病，必须断食断水，如果肠胃里面有食物和水分，病菌就会一直有而且拉稀更频繁，之后带到“正规兽医站“输液消炎和输营养液，之后打血清，一般七天的疗程就可以恢复，冠状的治愈几率在95%左右（兽医站医生说的），疫苗对犬冠状病毒病没有预防效果。减少发病的措施，就是加强饲养管理，严格执行兽医卫生措施。
猫检测
介绍
猫传染性腹膜炎(FIP)是目前导致猫死亡的重要原因之一，从3个月到3龄猫以及大于10龄猫，特别是发生在那些纯种猫和其它数量及种类繁多但养在一起的家养猫。猫冠状病毒FeCV(Feline enteric Coronavirus)是高度传染性病毒而且偏好发生在数量及种类繁多而且养在一起的家养猫。FeCV给猫带来了极大的危险，FeCV阳性通常被认为是FIP的前奏。要控制猫FIP根本的方法就是要做好FeCV的预防和控制。FeCV是广泛的猫冠状病毒Feline Coronavirus (FCoV)中的一种，FeCV抗体的存在仅表示有FeCV病毒存在和/或感染了FIP的可能性。对FeCV抗体呈阳性结果也不一定表示猫得到了FeCV病毒和/或感染了FIP，应该要和其它临床症状结合起来一齐判断。但阴性结果可说明没有FeCV病毒和/或感染了FIP。
检测原理
酶标板的孔中包被有纯化的冠状病毒抗原。从金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus提取的蛋白A与HRP结合成复合物。血清或血浆样品和蛋白A酶标记物一起在酶标板的孔中孵育。如果猫样品里存在FCoV抗体，抗体将与孔中的抗原结合，再与蛋白A酶标记物结合。多余的酶标记蛋白A被洗掉，加入发色底物。清晰的蓝色表示FCoV抗体存在，没有颜色变化表明没有FCoV抗体。
该试剂盒具有高特异性和灵敏度，操作简单，30分钟内可以知道结果。试剂盒里包括阳性质控和阴性质控，仅需肉眼通过与阴性质控颜色进行比较，就可以准确地判断样品里FCoV抗体的存在。
样品
需1ul血清或血浆，只能检测猫的样品。样品可在2-8C保存7天，如果需要更长的保存，样品可保存在-20C。严重红细胞溶解或脂溶血会产生干扰的颜色，所以尽可能去得到更好质量的样品。
准备洗涤液
让洗涤浓缩液达到室温，轻轻地倒置混匀。用蒸馏水或去离子水稀释洗涤浓缩液（1份洗涤浓缩液加至9份水中），稀释后的洗涤液可保存于2-7上升℃。
结果
a. 检测的有效性必须是：阳性质控孔里的液体呈清晰的蓝色，而阴性质控孔里的液体保持清澈。
b. 假若样品孔的颜色变化比阴性质控孔深很多则表明，该动物以前或目前正受到FCoV感染，并且有可能通过排泄物传播病毒。此时便需要与其它的临床数据结合起来以确诊FIP。
c. 如果样品孔里无颜色变化表明没有感染FIP疾病。
试剂盒组份
以下内容物包含在试剂盒里：
包被好的酶标板 8×12孔
阳性质控血清 1.5ml
阴性质控血清 7.0ml
蛋白A HRP标记物 5.0ml
TMB 7.0ml
底物缓冲液 7.0ml
浓缩洗涤液 100.0ml
注意事项
* 试剂盒使用前恢复至室温（21-25C）
* 不同样品使用不同的加样器头
* 不要把试剂盒直接暴露在阳光下
* 不要使用过期的试剂或不同试剂盒里试剂一齐混杂使用
* 严格按照步骤操作，不适当的洗涤或试剂污染将产生非专一性的颜色
* 兽医使用
保存和稳定性
将试剂盒和稀释的洗涤液保存于2-7℃，不要冷冻。只要在适当保存条件下，试剂在有效期内是稳定的。
参考资料
- 1. 犬瘟热一犬冠状病毒双重PCR诊断方法的建立及初步应用 ．万方数据库[引用日期2019-03-12]
- 2. 犬冠状病毒分子生物学研究进展 ．万方数据库[引用日期2019-03-12]
- 3. 犬冠状病毒的分离及鉴定 ．维普[引用日期2019-03-12]
学术论文
内容来自
- 胡桂学，高凤山，夏咸柱等. 大熊猫犬冠状病毒的分离与鉴定． 《 畜牧兽医学报 》 ， 2004
- 乔军，孟庆龄，夏咸柱等. 犬瘟热、犬冠状病毒联合RT—PCR检测方法的建立及应用． 《 西南农业学报 》 ， 2002
- 高凤山，胡桂学，夏咸柱等. 联合PCR诊断大熊猫犬瘟热和犬冠状病毒的混合感染． 《 吉林农业大学学报 》 ， 2003
- 胡桂学，高凤山，夏咸柱等. 大熊猫犬冠状病毒的分离与鉴定． 《 吉林省畜牧兽医学会学术年会 》 ， 2003
- 范志强，夏咸柱，武银莲等. 检测犬冠状病毒中和抗体的方法与应用． 《 中国预防兽医学报 》 ， 1998