组织分散酶 DISPASE^® I、DISPASE^® II

　　DISPASE^® 是切断肽链的中性、非极性氨基酸N 末端的金属蛋白酶，能够把上皮细胞从组织上剥离成片状。以前技术人员一直把它用于原代培养的细胞分离以及分散。近年，在再生医学和组织工程的领域上也有广泛应用，可以和胶原酶配合使用。此酶分离细胞迅速有效又温和，细胞能保持完整，不会给细胞膜带来伤害，无动物源原料，不含支原体或动物病毒污染，对于血清成分、酶浓度、处理事件、温度、pH非常稳定。

	DISPASE®Ⅰ	DISPASE® Ⅱ
特性	结晶酶，无菌产品	粉末酶，非无菌产品
包装	6小瓶	1g
酶活性	10,000-13,000 PU/小瓶	300,000-360,000 PU/g
添加剂等	含有醋酸钙	含有糊精和醋酸钙
储存·有效期	生产后在2～10℃下可储存2年（未开封）； 　开封溶解后请冻存在-20℃以下，并在6个月内使用。

◆优点、特色

●  DISPASE^® 是来源于Paenibacillus sp. （旧名：Bacillus polymyxa ）的中性金属蛋白酶。活性中心

　　　  有Zn²⁺，比Ca²⁺ 稳定。

●  酶活性几乎不受血清成分影响，因此不论是否有血清，都可以使用本产品。同时可简单地通过添加EDTA

　        或者稀释反应液来停止酶反应。

●  可以很好地分解构成基底膜的Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白，让上皮细胞从组织上剥离成片状。

●  与胰蛋白酶、胶原酶等蛋白酶的作用不同，造成的细胞损伤更少，可温和地分散细胞。

●  由于作用条件的范围广泛，可以在不同的酶浓度、处理时间、温度以及pH 条件下，使酶发生作用。

●  细胞培养温度一般在37℃，酶在此温度下非常稳定。根据细胞种类的不同，可以往培养基里添加本产品，

　         进行悬浮培养。

●  本产品不含支原体。

●  本产品没有使用动物源原料。

◆案例、应用

酶浓度	100 ～ 2,000 PU/mL
溶解液	含有Ca2+ 的缓冲液或者培养基（可含有血清）
反应时间	30 分钟～几天
反应温度	室温～ 37℃
反应pH	6.5 ～ 9.0
抑制因子	EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+

 

※ 1PU 的定义是使用酪蛋白分解法1 分钟内分离1 微克酪氨酸的酶活性。

◆资料

点击查看

1. Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 377-382 (1975).

2. Matsumura T, et al. Jpn. J. Exp. Med. 45, 383-392 (1975).

3. Rheinwald JG, et al. Cell. 6, 317-330 (1975).

4. Green H, et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 76, 5665-5668 (1979).

5. Kawakita T,et al. Invest. Ophthalmol. vis. Sci. 50, 4611-4617 (2009).

6. Kitano Y, et al. Br J Dermatol. 108, 555-560 (1983).

7. Thomson J.A, et al. Science. 282, 1145-1147 (1998).

8. Yan X, et al. Stem Cells Dev. 19,469-480 (2010).

9. Kurt S. Stenn et al. J. Invest. Dermatol. 93, 287-290 (1989).