TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit酶试剂盒Takara


TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
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Takara 9781S TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit 10 Rxns ¥150 TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
Takara 9781 TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit 50 Rxns ¥650 TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
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■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分Part I 与 Part II两部分。
□ Part I -20℃保存
Proteinase K (20 mg/ml) 1 ml
RNase A (10 mg/ml) 500 μl
 
□ Part II 室温 (15-25℃) 保存  
10×Buffer RCL A*1 2 ml × 2
10×Buffer RCL B*2 16 ml
Buffer GB*3 12 ml
Buffer WA*3 28 ml
Buffer WB*4 24 ml
Elution Buffer 14 ml
Spin Columns 50 支
Collection tubes 50 支
*1和*2使用前按照1:4的比例混合,得到10×Buffer RCL (红细胞裂解液) 。该10×Buffer RCL可以现用现配或在首次使用时将*1全部倒在*2的试剂瓶中,于4℃可保存1年。
*3含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*4在首次使用前,请添加56 ml的100%乙醇,混合均匀。
 
■ 制品说明
本试剂盒用于从1 μl~1 ml加入各种抗凝剂的无核红细胞 (如哺乳动物) 全血中提取基因组DNA,或从加入各种抗凝剂总体积不超过10 μl的有核红细胞 (如鸟类、鱼类) 全血中提取基因组DNA。试剂盒采用了特别的红细胞裂解方法裂解全血中的大量无核红细胞,再由细胞裂解液裂解白细胞并释放基因组DNA,再结合DNA制备膜技术纯化基因组DNA。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,整个提取操作过程仅需1个小时便可获得高纯度的基因组DNA。提取得到的基因组DNA可用于PCR反应、Southern杂交以及RAPD、AFLP、RFLP等多种分子生物学实验。
 
■ 保存与运输
1. 本试剂盒分两部分保存和运输,Part I请在-20℃保存和运输;Part II在室温下 (15-25℃) 保存和运输。
2. 10×Buffer RCL A,10×Buffer RCL B可于室温下保存,按比例混合后的10×Buffer RCL可于4℃保存1年,客户可根据实际使用情况决定保存方式。
 
■ 实验操作流程图
TaKaRa MiniBEST Whole Blood Genomic DNA Extraction Kit
 
■ 注意事项
1. 应尽量使用新鲜全血,避免反复冻融,以确保提取的基因组DNA的收量及完整性。
2. 血液样品的保存:
① 短期保存:已加入抗凝剂的血液样品可在2~8℃保存最多10天,对于某些实验,例如Southern杂交等,需要得到完整全长的基因组DNA,将血液样品在2~8℃保存请不要超过3天。
② 长期保存:已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存,血液样品应尽量避免反复冻融。
3. 部分试剂中含刺激性化合物,操作时请戴上乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤和眼睛等,并应尽量在通风橱中进行操作。若沾染皮肤、眼睛,要立即用大量清水冲洗,必要时应寻求医疗咨询。
4. 基因组DNA需长期保存时,建议用Elution Buffer洗脱。
5. 标准实验操作适用于人全血材料,其他哺乳动物全血操作基本相同。只是在裂解红细胞时不尽相同,例如马血等材料需要多次处理,才可使红细胞裂解充分 (红细胞膜较厚) ;而一些小型的动物可能需要减少裂解时间和次数。
6. 离心时切不可使用过大的离心力,否则白细胞将会破损,而无法正常悬浮。
7. 10×Buffer RCL是由10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B按照1:4比例混合配制得到,可以现配现用,也可以在首次使用时将10×Buffer RCL A和10×Buffer RCL B全部混在一起,然后保存在4℃,可以保存一年以上。
8. 在使用前一定要确认待提取全血的红细胞是否有核,如果为红细胞有核的全血,若起始量超过10 μl则可能造成Spin Column堵塞。