Human Stem Cell Derived Microglia酶试剂盒Takara

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Human Stem Cell Derived Microglia
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Cellartis Y50045 Cellartis® Microglia (from ChiPSC12) Kit 1 Kit ￥19,200 Human Stem Cell Derived Microglia Human Stem Cell Derived Microglia Human Stem Cell Derived Microglia
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来源于人类iPS细胞的小胶质细胞
(Microglia Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells)
小胶质细胞（Microglia）是神经胶质细胞的一种，近年来研究报道显示，小胶质细胞在中枢神经系统免疫反应和内稳态平衡中发挥多种功能，包括神经组织的保护、再生、损伤修复等。另外，在神经退行性疾病中，如阿尔茨海默症和帕金森症等，也涉及小胶质细胞的持续过度激活。
 
Cellartis Microglia (from ChiPSC12)是由人iPS细胞（ChiPSC12）定向分化获得的小胶质样细胞，分化过程中包括有卵黄囊巨噬细胞的发育和小胶质细胞的体外再生。Cellartis Microglia与原代小胶质细胞显示相似的特征，如高表达小胶质细胞标志物（Iba1, P2Y12），拥有突起结构的细胞形态等。Cellartis Microglia同样具备原代小胶质细胞的功能特征，如对β淀粉样蛋白质的吞噬作用，对ATP有趋化性反应，受脂多糖刺激而释放细胞因子等。
 
本产品包括一支冷冻的细胞Cellartis Microglia (from ChiPSC12)和培养基Cellartis Microglia Culture Medium，可以制备高功能性的小胶质样细胞。
 
本产品由Takara Bio Inc.制造并销售，其中使用到的人iPS细胞向小胶质细胞分化方法，是以从Shionogi & Co., Ltd.获得的全球独家许可为基础。
 
■ 产品特点
· 与原代小胶质细胞具备相似的细胞形态，拥有突起结构。
· 高表达标志物（Iba1, P2Y12等）。
· 具备功能特征，对β淀粉样蛋白质的吞噬作用，对ATP有趋化性反应，受脂多糖刺激而释放细胞因子等。
 
■ 产品应用
· 神经退行性疾病研究及药物研发
 
■ 产品组成
· Cellartis Microglia (from ChiPSC12) Frozen cells (1 vial, >1 x 106 cells) (≥ 8 x 105 viable cells)
· Cellartis Microglia Culture Medium (Cellartis Microglia Culture Basal Medium, 1 bottle, 50 ml; Cellartis Microglia Culture Supplement, 1 vial, 5 ml)
 
Human Stem Cell Derived Microglia
 
■ 实验例
1. Cellartis microglia细胞形态
 
Human Stem Cell Derived Microglia
在解冻后至少第8天前，Cellartis microglia均显示正常的细胞形态。
 
Human Stem Cell Derived Microglia
与原代小胶质细胞形态相似，Cellartis microglia也拥有突起结构。
 
2. Cellartis microglia表达小胶质细胞特异标志物Iba1和P2Y12
 
Human Stem Cell Derived Microglia
A. 解冻后第2天，90%的Cellartis microglia呈现Iba1阳性和P2Y12阳性。B. RT-qPCR分析显示，Cellartis microglia中P2Y12表达量显著高于未分化的hiPSCs，以GAPDH为内参统计。
 
3. Cellartis microglia显示对β淀粉样蛋白质的吞噬作用
 
Human Stem Cell Derived Microglia
Cellartis microglia解冻并培养2天，然后与β淀粉样蛋白质（Amyloid-β）低聚物孵育，分为细胞松弛素D（Cytochalasin D）前处理组和不处理组。Microglia显示了对β淀粉样蛋白质的吞噬作用，并且由于细胞松弛素D的前处理，Microglia的吞噬作用受到了抑制。
 
4. Cellartis microglia受脂多糖刺激活化
 
Human Stem Cell Derived Microglia
解冻后第二天, 使用脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）刺激Cellartis microglia，分为添加苯甲酰苯甲酸三磷酸腺苷（BzATP组）和不添加组。观察到在LPS刺激下，炎症细胞因子的分泌呈现浓度依赖。图A、B、C分别显示LPS刺激下IL-6、TNF-α和IL-1β的分泌情况。
 
5. Cellartis microglia对ATP有趋化性反应
 
Human Stem Cell Derived Microglia
来自不同批次的Cellartis microglia解冻后直接使用钙黄绿素AM（Calcein AM）染色，并置于一次性细胞迁移系统Chemotaxis system中（图A）。两个批次的Cellartis microglia都显示了对0.1 mM ATP的趋化性反应（图B）。