TaKaRa EpiTaq HS (for bisulfite-treated DNA) 是用于亚硫酸氢盐修饰后含有尿嘧啶的模板DNA进行PCR扩增时所需的理想DNA聚合酶。亚硫酸氢盐修饰后的DNA有时会影响PCR反应性能,本制品中的镁离子及dNTP浓度经调整后可调节扩增效率和反应特异性,能够很好地扩增难扩增的目的片段。 本制品适用于Hot Start PCR,高温加热前,抗Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制聚合酶的活性,从而抑制低温条件下由引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤已变性,因此无需特殊变性,在常规的PCR反应条件下即可使用。 |
|
■ 保存 |
-20℃。 |
|
■ 制品说明 |
本制品是用于DNA甲基化状态分析的试剂盒。试剂盒的原理是通过使用改进的亚硫酸氢盐法处理,将DNA中的未甲基化的胞嘧啶残基转化成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶 (5-mC) 没有通过这种处理转换,因此可以区分甲基化的胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶。经亚硫酸氢盐处理后,未甲基化的DNA和甲基化的DNA将具有不同的碱基序列,可以通过PCR扩增和其他方法例如测序和限制性内切酶处理进行DNA甲基化分析。 与传统方法相比,该产品可以缩短操作时间,降低成本,起始DNA量可以低至50 pg。对于处理后的DNA回收,我们提供易于操作的柱纯化方法。 本制品适用于胚胎发育,基因表达,染色质功能,基因组印迹,癌症等疾病研究中的DNA甲基化分析。 |
|
【下游进行PCR扩增】 |
当以亚硫酸氢盐处理的DNA作模板并且对修饰后含有尿嘧啶的DNA进行扩增或选择COBRA方法在进行PCR扩增时,我们推荐使用TaKaRa EpiTaq HS (用于亚硫酸氢盐处理的DNA) (product code R110A/B)。 此外,推荐使用EpiScope MSP试剂盒(product code R100A/B)通过real-time PCR 或endpoint PCR进行甲基化特异性PCR (MSP) 分析。 |
|
|
Technote: |
Superior amplification of bisulfite-treated DNA for methylation studies |
|
|