| NheI |
| 产品编号: D6489 |
| 产品包装: 200U |
| 产品价格: 132.00元 |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D6489 | NheI | 200U | 132.00元 |
NheI内切酶为进口分装，基本信息如下：
| 识别序列 | 缓冲液兼容性(%) | 酶切温度 | 失活条件 | 甲基化干扰？ | |||||
| G^CTAGC CGATC^G |
1X B | 1X G | 1X O | 1X R | 1X Y | 2X Y | 37℃ | 65℃ 20min |
有时有干扰 |
| 100 | 20-50 | 0-20 | 0-20 | 100 | 0-20 | ||||
根据识别序列邻近序列的不同，酶切效果受GC methylase导致的DNA甲基化的影响。
酶储存液组成为：10mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃)，50mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。
1X Buffer Y组成为：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassium acetate，0.1mg/ml BSA。
酶切和连接效率：50倍过量的本内切酶消化1小时，>95%被酶切的片段可以被连接并被重新酶切(recut)。
活性单位定义：在37℃，50微升反应体系中反应1小时，将1微克的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位，即1U。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D6489-1 | NheI(10U/μl) | 200U |
| D6010Y | 10X Buffer Y | 1ml |
| － | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。
特别注意：甘油含量大于5%，低盐浓度，pH >8.0或酶大大过量(约20倍以上)可能会导致星号活性，即产生非特异性酶切。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
使用说明：
1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行：
| 待酶切DNA | 不超过1μg |
| 双蒸水或Milli-Q水 | 适量 |
| 10X Buffer Y | 2μl |
| NheI | 0.5-1μl |
| 总体积 | 20μl |
| 37℃孵育1小时或更长时间 | |
说明：请注意把Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶，加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻Vortex混匀。通常参考上述条件孵育1小时已经足够，但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜，可以使用更少量的酶。待酶切DNA量较大时，可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。
2. 双酶切或多酶切时，需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
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