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BsaI-HF®v2
我们很高兴地宣布,所有反应缓冲液中均已不含 BSA(牛血清白蛋白)。从 2021 年 4 月开始,NEB 将含有 BSA 的反应缓冲液转换为含有重组白蛋白(rAlbumin)的缓冲液,用于限制性内切酶和某些 DNA 修饰酶。如需更多信息,请访问 www.neb.cn/BSA-free。
Golden Gate 组装用户须知:BsaI-HFv2(NEB #R3733)针对 Golden Gate 组装* 进行了优化。BsaI-HFv2 同样适用于任何需要使用 BsaI 切割 DNA 的实验流程。任何需要在 5′-GGTCTC(N1)/(N5)-3′ 识别序列处进行酶切的推荐用酶。
*Golden Gate 组装过程中对 DNA 酶切的要求比传统 DNA 克隆更为严苛。用于 Golden Gate 组装的限制性内切酶必须可以在酶的非最适缓冲液中反应良好,并在动态的酶切/重新连接反应中,在内切酶与连接酶竞争性结合底物的前提下,在更高的反应温度下,延长酶切时间,仍然拥有活性。大量测试表明,在具有挑战性的 Golden Gate 组装实验(限制性内切酶酶切效率和保真性至关重要)中,相较于 BsaI(NEB #R0535)和 BsaI-HF(NEB #R3535),BsaI-HFv2 的性能更优越。
高保真(HF®)限制性内切酶具有与天然酶相同的特异性,但经过改造后显著降低星号活性,并使用统一的缓冲液(rCutSmart™ 缓冲液)。所有 HF 限制性内切酶均随附 6X 紫色凝胶上样染料。经过改造的内切酶与天然内切酶相比较,虽然价格相同,但性能和性价比更高:
- 为提高性能进行基因工程改造
- 用于 Golden Gate 组装;在常用于此用途的 T4 DNA 连接酶缓冲液中保持高活性水平
- IIS 型限制性内切酶能识别非回文 DNA 序列,并在识别序列之外进行切割
- 在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性
- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 降低星号活性
- NEB 开发了便捷的 Golden Gate 组装试剂盒(使用 BsmBI-v2 和 BsaI-HFv2)。
- 限制性内切酶酶切位点:GGTCTC(1/5)
“我真的很喜欢 BsaI-HFv2。我们再次获得了惊人的 GGA 结果,背景极低。”
- – 美国北卡罗来纳州戴维森学院首席研究员 M.C
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