297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口–wako富士胶片和光

品牌 Dr.Ehrenstorfer/德国 供货周期 一个月

淀粉分解会产生二糖类,α-葡萄糖苷酶能分解二糖类产生葡萄糖,从而使动物体血液汇总中的血糖值升高。因此,我们可以通过抑制α-葡萄糖苷酶来抑制血糖值的上升。
近来有研究表明从不同的植物体中可以检测到α-葡萄糖苷酶抑制物质,研究人员正致力于将其应用到抑制血糖上升的食品当中。
α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口

食品分析用α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口

淀粉分解产生二糖,α-葡萄糖苷酶能分解二糖产生葡萄糖,从而使血液中的血糖升高。因此,可以通过抑制α-葡萄糖苷酶来抑制血糖的上升。

近来有研究表明从不同的植物体中可以检测到α-葡萄糖苷酶抑制物质,研究人员致力于将其应用到抑制血糖上升的食品当中。

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒能测定对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。与LabAssay™ Glucose配套使用,可用于检测食品等成分中所含有的α-葡萄糖苷酶活性抑制作用。

 

试剂盒内容

297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口--wako富士胶片和光试剂名称

容量

数量

主要成分

1mL

2

α-葡萄糖苷酶

缓冲剂

50mL

2

马来酸/顺丁烯二酸二钠

基质1

20mL

2

D-(+)-麦芽糖

基质2

20mL

2

蔗糖

阳性对照

100mg

1

阿卡波糖

 

除试剂盒外所需器具、器材

  • LabAssay™ Glucose
  • 96孔透明微孔板
  • 酶标仪(505 nm吸光度)
  • 微量移液管
  • 恒温槽(37℃)

检测原理

抑制物质(阿卡波糖等)

 

LabAssay™ Glucose检测生成的葡萄糖

 

果糖

 

LabAssay™ Glucose

 

葡萄糖

 

葡萄糖

 

α葡萄糖苷酶

 

蔗糖

 

麦芽糖

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检测步骤

Ⅰ.配制试剂

阳性对照溶液

1mg/mL

(配制稀释梯度为:84210.5μg/mL

 

麦芽糖溶液

 

纯净水

 

称量

 

阳性对照

 

酶稀释液

*稀释倍数根据预实验的结果而定

例:麦芽糖用10倍稀释,蔗糖用2.5倍稀释

 

 

稀释

 

蔗糖溶液

 

100mmol/L

马来酸缓冲液 pH 6.0

 

基质 1

 

基质 1

 

缓冲液

20ml

 

缓冲液

20ml

 

纯净水

50ml

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决定稀释倍数的预实验

 

麦芽糖

蔗糖

基质溶液

麦芽糖溶液 50μL

蔗糖溶液 50μL

纯净水

25μL

37℃,3分钟

酶稀释液25μL(例:5, 10, 20倍稀释液)

酶稀释液25μL(例:1(原液), 2.5, 5倍稀释液)

搅拌后, 37℃,准确反应30分钟

纯净水

400μL

立即在沸水中加热3分钟后,冷却

 

(葡萄糖定量)
① 96孔微孔板中分别加入100μl的酶反应液和稀释的葡萄糖标准液(浓度:15,10,5,2.5mg/dl)

添加150μL LabAssay™ Glucose显色剂,充分混合。

 37℃下进行10分钟温育,测定505nm的吸光度。

297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口--wako富士胶片和光 麦芽糖的葡萄糖生成量为10mg/dL,蔗糖为5mg/dL,以此求稀释倍率。

 

                                            

 

 

Ⅱ.正式试验(酶反应)

<样品配制>

 

麦芽糖

蔗糖

基质溶液

麦芽糖溶液 50μL

蔗糖溶液 50μL

样品溶液或阳性对照溶液
(对照组是纯净水)

25μL

37℃, 3分钟

稀释液

酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数)

酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数)

搅拌后,37℃下,准确反应30分钟

纯净水

400μL

立即在沸水中加热3分钟后,冷却

 

<空白对照配制>

 

麦芽糖

蔗糖

基质溶液

麦芽糖溶液 50μL

蔗糖溶液 50μL

样品溶液或纯净水

25μL

纯净水

400μL

酶稀释液

酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数)

酶稀释液25μL(根据预实验决定稀释倍数)

立即在沸水中加热3分钟,冷却

葡萄糖定量

同预试验,使用LabAssay™ Glucose测定。

 

Ⅳ.IC50计算

  • 以对照溶液的葡萄糖生成量为α葡萄糖苷酶的100%活性,通过各浓度样品溶液的葡萄糖生成量,求α-葡萄糖苷酶比活性;
  • 以样品或阳性对照溶液浓度(酶反应液中的终浓度)为横轴,以α-葡萄糖苷酶比活性为纵轴绘制半对数线图,从得出的近似曲线算出比活性50%时样品的浓度(IC50值)。

 

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒中进行

 

从近似曲线算出IC50

 

LabAssay™ Glucose定量葡萄糖浓度

 

配制包括空白样品的各浓度样品

(含阳性对照溶液样品)

 

分析样品

 

沸水加热3分钟后冷却

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  1. 基质溶液  50μl
  2. 样品溶液 25μl

(或阳性对照溶液)

297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口--wako富士胶片和光

产品列表

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒

产品编号

产品名称

规格

容量

297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口--wako富士胶片和光297-78601

α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒α-Glucosidase Inhibitory Activity Assay Kit

食品分析用

96次用

 

葡萄糖定量用试剂盒

产品编号

产品名称

规格

容量

298-65701

LabAssay™ Glucose

细胞生物学用

1,000次用

 

抑制剂

产品编号

产品名称

规格

容量

194-17841

Salacinol Standard, Synthetic

食品分析用

5mg

043-24931

1-Deoxynojirimycin

生化学用

10mg

020-12631

N-Butyl-1-deoxynojirimycin

生化学用

10mg

229-01891

Voglibose

药理研究用

10mg

138-16221

Miglitol

药理研究用

10mg

134-16223

100mg

 

297-78601-α-葡萄糖苷酶活性抑制检测试剂盒日本和光Wako进口--wako富士胶片和光酶标仪 (多模式成像酶标仪

产品名称

生产厂商

Spark® 20M

TECAN