上海金畔生物worthington 胶原酶现货说明书
Collagenase
粗胶原酶制剂含有两种不同的胶原酶的几种亚型,一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨基肽酶。这种胶原分解和蛋白分解活性的结合有效地分解细胞间基质,细胞间基质是组织分解的重要部分。复合物的一种成分是一种水解酶,它优先降解天然胶原中的螺旋区,位于Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly键,其中Y最常见的是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步消化肽酶的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制,但不被DFP抑制。α2-巨球蛋白(一种大的血浆糖蛋白)也对其有抑制作用。酶活性需要Ca2+。每种胶原酶的特定酶谱都与获得研究细胞的组织(或细胞的用途)相关,因此Worthington建立了几种类型的粗胶原酶:1型、2型、3型和4型。
•1型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
•2型含有较高相对水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
•类型3含有低水平的次级蛋白酶。
•类型4的胰蛋白酶活性特别低,以限制对膜蛋白和受体的损害。
•5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。
•6型含有高胶原酶活性,酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1。与I型(col G)相比,设计用于II型(colH)胶原酶的富集。
•7型胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型胶原酶高4倍。
•纯化的胶原酶,代码:CLSPA,含有低的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。
新无动物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2胶原酶来源于不含动物成分的培养基中生长的培养物,设计用于必须防止引入潜在动物源病原体的生物加工应用。次级蛋白酶的水平类似于1型和2型胶原酶。
•CLSAFA是最初的AFA等级,旨在具有与1型和2型胶原酶相似的胶原酶和次级蛋白酶。
•CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
•CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性,类似于4型胶原酶。
•STZ1和STZ2,0.22μ过滤STEMxyme®AOF胶原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物,用于原代和干细胞分离。
沃辛顿还提供预包装形式的每种0.22µm过滤制剂,用于直接重组和用于细胞分离和培养程序。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性很好,部分原因是使用参数的变化。然而,大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。沃辛顿胶原酶和污染物分析的详细描述可在沃辛顿酶手册中找到。此外,组织特异性参考和详细的分离条件可在沃辛顿组织分离指南中找到。
胶原酶测定是Mandl的改进,其中胶原酶与天然胶原孵育5小时,并使用Moore和Stein,JBC,176367,(1948)比色茚三酮法测定胶原分解程度。释放的氨基酸表示为每毫克胶原酶微摩尔亮氨酸。
用途:粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织分离过程。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂,如1型、2型、3型和4型,或色谱纯化的胶原酶(代码:CLSPA);后者通常与二级酶(如弹性蛋白酶、透明质酸酶等)结合。为了获得最佳结果,蛋白水解活性的精确混合物必须适合待分离的组织。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好,可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。有关更多信息,请参阅胶原酶采样程序信息。沃辛顿还出版了《组织解离指南》,该指南提供了用于这些应用的酶的额外信息,以及多种细胞和组织类型的特定参考。
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细胞分离Optimizi
描述:
STEMxyme®1,胶原酶/中性蛋白酶(Dispase)
来源:溶组织梭菌/多粘菌芽孢杆菌
无动物溶组织梭菌胶原酶(代码:CLSAFB)和无动物多粘菌中性蛋白酶的特殊组合,每毫克干重至少含有250 CLS单位和1000酪蛋白酶单位。设计用于干细胞和其他原代细胞分离和生物处理应用,必须防止引入潜在的动物源性病原体。
储存于2-8°C。
货号:LS004106
worthington LS004106