现货genovis FabRICATOR®酶说明书
FabRICATOR®酶
FabRICATOR酶以冻干粉形式提供,不添加防腐剂,2000和5000个单位小瓶可用于消化高达2-5 mg IgG。
FabRICATOR(IdeS)是一种半胱氨酸蛋白酶,它在铰链下方的特定位置消化抗体,孵育30分钟后产生F(ab’)2和Fc/2片段的同质池。
详细信息
FabRICATOR(IdeS)是一种酶,它在铰链区下方的特定位置消化IgG,产生F(ab’)2和Fc/2片段的同质池。除IgG外,没有其他已知的底物。IgG在30分钟内被消化,如果培养时间延长,则不会有过度消化的风险。由于FabRICATOR在生理反应条件下消化IgG,免疫反应性得以保留。最佳活性在37°C下获得,但消化也可以在室温下使用延长的反应时间进行。
FabRICATOR消化人类的所有亚类,以及猴子、兔子和绵羊的某些IgG。它对小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-为了消化这些抗体种类,我们建议使用FabRICATOR Z。
使用FabRICATOR消化IgG,然后还原,产生三个25kDa大小的片段(Fd'、Fc和LC),可使用LC-MS仪器轻松分析。高精度的质量分布能够检测抗体微变异,如糖基化、C-末端赖氨酸剪切、氧化和脱酰胺等。
FabRICATOR是从化脓性链球菌中克隆出来的,并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签,分子量为37725Da。FabRICATOR是一种重组修饰形式的IdeS,由Genovis AB开发,用于要求最高标准和一致性的生物技术应用。
储存和稳定性
将FabRICATOR酶冷冻干燥并通过加水进行重组。重组后,FabRICATOR在+4-8°C下稳定1个月。产品在环境温度下运输,到达时应储存在-20°C。
缓冲区
以下缓冲液已在不同pH下测试与FabRICATOR消化的兼容性。注意,FabRICATTOR酶在pH 5.0以下不可逆失活。pH 8.0以上的消化需要延长/优化的条件。
磷酸盐缓冲盐水(PBS)6.0–8.0
Tris缓冲区7.0–8.0
MES缓冲区5.5–6.5
HEPES缓冲液7.0–8.0
碳酸氢铵缓冲液6.0–7.0
乙酸钠缓冲液6.0
单位定义
在37°C下,在10mM磷酸钠、137mM NaCl、2.7mM KCl pH 7.4中孵育30分钟时,一个单位消化≥95%的1µg人IgG。
Genovis A0-FR1-050