PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

产品详情

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KlenTaq-S 测序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版，为 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突变。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶，KlenTaq-S 测序酶具有很强的 ddNTP 的渗入能力，因此其适用于终止法 DNA 测序或焦磷酸解反应 SNP 分析。

本公司 KlenTaq-S 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

活性单位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1，30 min 内将 10 nmole dNTP 掺入酸不溶性物质所需的酶量。

特点

1.尤其适合 ddNTP 等修饰核苷酸的掺入反应

2.相比全长 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

适用范围

ddNTP 终止法DNA 测序（一代测序）

焦磷酸解反应延伸法 SNP 分析

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

应用举例

以下反应举例为 50 μl 标准 PCR 体系，仅供参考。实际 PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

1） 按下表配制反应体系

*模板DNA用量参数(50 μl反应体系):

人基因组DNA100-1000 ng ; 微生物基因组DNA 10-100ng；PCR产物 1 ng-10 ng； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

2） 按如下条件进行反应，

3） 琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物，或按实验目的进行后续操作。

注意事项

1.PCR 条件和野生型 Taq DNA 聚合酶类似，对特定 DNA 的测序反应可能需要优化。

2.本酶扩增能力较野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低，PCR 产量有所降低，不建议用于常规 PCR。

3.不可用于 Taqman 探针法 q-PCR。

浓度

5U/uL

运输与保存

-20℃可保存 2 年，避免反复冻融