上海金畔生物现货progen PRAAV2R说明书

AAV2 Titration ELISA 2.0R

主要特征

ELISA原理：

该测定基于夹心 ELISA 技术，其中对组装的 AAV 衣壳上的构象表位具有特异性的重组抗体包被到板上，用于从样本中捕获 AAV 颗粒。

捕获的 AAV 粒子的检测是一个两步过程。

1. 生物素偶联的重组抗体与捕获的 AAV 颗粒结合。

2. 链霉亲和素过氧化物酶偶联物与生物素分子反应。添加底物会导致颜色反应，该反应与特异性结合的病毒颗粒的量成正比。

AAV 量化方法的比较：

每种常用的量化方法都有其优缺点：

• qPCR被广泛使用，但存在一些问题，例如样品制备、引物设计或 PCR 效率，这些问题会导致实验室间结果的高度差异。

• 数字液滴 PCR方法克服了 qPCR 的一些局限性。然而，由于不同的样品处理协议，实验室之间的差异仍然可能发生。

• 如果使用可靠的参考材料，斑点印迹是一种简单且定量的方法。然而，它通常受到蛋白质印迹的有限线性和动态范围的影响。

鉴于上述技术的实际缺点，传统的夹心 ELISA 目前在实验室间和实验室内的变化以及易用性方面似乎更胜。因此，它代表了可靠和可重复量化总 rAVV 衣壳滴度的最佳格式。

使用 shuffled/mutated AAV：

改组/突变 AAV 载体的识别取决于受改组/突变影响的特定衣壳区域。用于 PROGEN 的 AAV ELISA 的捕获抗体结合特定的，在某些情况下，结合明确的构象表位。这些表位由相应 AAV 血清型的衣壳组装产生。ELISA 可能识别您的改组/突变 AAV 载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而，衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象，因此 AAV 衣壳上呈现的表位的构象。这可能会影响抗体的结合亲和力，并影响基于 AAV ELISA 试剂盒提供的（非改组）试剂盒对照的滴度确定。由于这些属性在很大程度上取决于执行的特定改组/突变，因此 PROGEN 无法保证对改组/突变的 AAV 载体进行成功和精确的量化。即使抗体结合表位仍然存在于您改组/突变的 AAV 衣壳上，您的检测也需要针对您的特定 AAV 载体进行测试和优化。

PROGEN 强烈建议生产和校准合适的（改组/突变）试剂盒对照，以确保使用 PROGEN ELISA 试剂盒对您单独改组/突变的 AAV 载体进行可靠的滴度测定。

有限使用标签许可：仅供研究使用的
产品由 PROGEN Biotechnik GmbH 拥有。将这些产品用于开发、制造和销售基于购买的产品和/或包括购买的产品的次级产品/衍生物需要基于特许权使用费的分许可协议