genaxxon M3009.0250说明书
SNP Pol DNA Polymerase
货号： M3009.0250
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SNP Pol DNA 聚合酶，用于简单、可靠和快速的等位基因特异性鉴别，例如。CRISPR / Cas9 点突变，用于检测不正确的 CRISPR / Cas9 产品，或验证测序结果。SNP Pol DNA 聚合酶具有高度特异性，无论是否存在引物-模板-复合物的错配。错配（点突变）必须位于引物的 3' 端。因此，突变等位基因可以与野生型等位基因准确区分开来——无需测序，因为聚合酶在错配的情况下根本不会扩增。
只需将您的引物放在假定的点突变上（重要：点突变必须在 3' 末端），聚合酶将以几乎 100% 的准确度检测该区域的错配：如果模板碱基与 3' 末端互补引物显示突变，而引物没有，不会发生扩增 – 短时间内 100% 确定！
因此，SNP Pol DNA 聚合酶可以轻松、省时且经济高效地用于点突变的筛选。
变体SNP PolTaq DNA 聚合酶 >具有 5'-3' 核酸酶活性，因此可用于特定水解探针，例如 Taqman® 探针或分子信标。
以*提供测试样品！德国境内无运费。测试样品价格将在产品的第一个正式订单中退还。
说明
SNP波尔DNA聚合酶>（您好GH狄单核苷酸scrimination) 是一种高度选择性的 DNA 聚合酶。它专为需要高鉴别率的等位基因特异性鉴别而开发：例如在等位基因特异性 PCR (ASA; AS-PCR)、等位基因特异性引物延伸 (AS-PEX)、SNP 分析、基因分型或甲基化- 特异性 PCR (MSP)。许多其他 DNA 聚合酶耐受错配的引物-模板复合物，因此不适合。另一方面，SNP Pol DNA 聚合酶专门区分这些（高辨别力）并仅提供具有匹配引物对的 PCR 产物！Genaxxon SNP Pol 和 SNP PolTaq DNA 聚合酶通过两个等位基因之间的等位基因特异性 PCR 差异高达 100%，并且在简单的 qPCR 后，给出关于存在哪个等位基因的明确结果。因此，
等位基因特异性 PCR 可用于量化野生型序列库或背景中的突变率。NGS确定的突变频率的验证 也可以通过等位基因特异性 PCR 和 SNP Pol DNA 聚合酶来验证。SNP PolTaq DNA 聚合酶非常适用于液体活检 样品的分析 。使用 SNP PolTaq，可以很好地分析和量化癌症突变的存在和频率。
下图：应用说明 SNP Pol DNA 聚合酶
我们建议设计具有较短扩增子长度（约 60-200 bp）的引物以获得最佳结果，但更长的扩增子长度也是可能的。如果更长的扩增子 > 500 bp，可能需要添加额外的镁 (+0.5 – 1.5mM)。
SNP Pol DNA 聚合酶（M3009 >或M3061 >）可与非特异性荧光染料（例如 Genaxxon's Green DNA Dye >或 SybrGreen®）一起用于实时 PCR。当使用特定的 PCR 探针时，只能使用 SNP PolTaq DNA 聚合酶，因为只有它们具有 5'-3' 核酸外切酶活性。
凭借我们的高品质 dNTPs Set (M3015.4100) >或Mix (M3016.1010) >或我们的DNA Ladders >以及我们有利的标准琼脂糖 (M3044) >我们可以为您的 PCR 提供其他产品。
SNP Pol DNA 和 SNP Pol DNA 聚合酶的应用领域
– 点突变的监测、验证和检测
– 识别正确或错误的 CRISPR/Cas9 产品
– 测序结果的验证/验证
– 突变的量化（例如 NGS 结果）
– SNP 检测通过等位基因特异性扩增 (ASA) / 等位基因特异性 PCR
– 亚硫酸氢盐处理的 DNA（CpG 甲基化侧）后的甲基化特异性 PCR (MSP)
– HLA 基因分型
– 微测序
– 使用水解探针的实时 PCR
– 实时多重 PCR
– 秀丽隐杆线虫中的 DamID-seq 数据。
作为 ChIP 的替代方案，最近显示通过测序鉴定 DNA 腺嘌呤甲基转移酶 (DamID-seq) 能够表征单个哺乳动物细胞中的结合位点。此外，DamID 可以通过在组织特异性启动子下以受控方式表达 Dam 融合蛋白来实现细胞类型特异性分析。在本报告中，我们提出了一个用户友好的管道来分析秀丽隐杆线虫中的 DamID-seq 数据。
Sharma R、Ritler D、Meister P.
秀丽隐杆线虫发育过程中核组织 DNA 腺嘌呤甲基转移酶鉴定分析的工具。创世纪。2016 年 2 月 4 日。doi：10.1002/dvg.22925。
– 使用 SNPase DNA 聚合酶进行 SNP 基因分型的微量测序可以通过以下描述的程序进行：
Lovmar L、Fredriksson M、Liljedahl U、Sigurdsson S、Syvänen AC。
通过微型测序和微阵列进行的定量评估揭示了全基因组扩增 DNA 的准确多重 SNP 基因分型。核酸研究。2003;31:e129。
– HiDi DNA 聚合酶的等位基因特异性错配选择性
Drum M、Kranaster R、Ewald C、Blasczyk R、Marx A (2014) 在等位基因和甲基化特异性扩增中具有更高选择性的水生栖热菌 DNA 聚合酶变体。PLoS 一 9（5）：e96640。doi:10.1371/journal.pone.0096640