PROGEN Biotechnik GmbH成立于1983年，是德国最早的生物技术公司之一，现已成为生命科学领域研究型抗体和免疫学检测学试剂成熟生产商和供应商。基于其免疫化学方面的核心竞争力以及 ISO 13485认证的通过，公司近年来扩大了合作和业务，以蛋白质检测，定量和纯化创新型的免疫学产品进入了新的研究领域。特别是在应用于基因治疗研究的AAV滴度检测质量控制体系的研发上。

腺相关病毒（AAV）是非致病性的单链DNA病毒，作为基因治疗的病毒载体，受到了广泛的研究。该病毒可感染多种分裂和非分裂细胞，基因稳定表达，低免疫源性。 AAV在多种疾病的多项临床试验中，没有显示出严重的不良反应。

PROGEN的AAV抗体可对已有AAV免疫反应的病人进行筛查，AAV ELISA检测试剂盒能够可靠地检测出病毒滴度，以确保治疗型病毒基因载体的合理用量。

       PROGEN的AAV病毒滴度 ELISA法检测试剂盒，提供了一种快速，灵敏且可重现的方法，用于AAVs病毒滴度的检测。产品包括1型，2型，3型，5型，6型,8型，9型和10型AAV检测试剂盒。试剂盒基于夹心ELISA技术，使用特异性的单克隆抗体特异性地捕获组装在AAV衣壳上的特异性蛋白，而未组装的衣壳蛋白上则不具有该特异性抗体检测的蛋白表位，不能被抗体捕获，从而大大降低了检测的假阳性率的产生。试剂盒中含有预包被抗体的96孔微孔板，链霉亲和素标记的抗体，标准品，底物和终止液等，使用方便。

 

上海金畔生物热销产品progen PRAAV8！！

 

AAV8滴定ELISA

*的微量滴定板酶免疫测定，用于定量完整的AAV8 wt病毒粒子，AAV8重组病毒体或人腺相关病毒8的组装和完整的空衣壳。捕获抗体检测未组装的衣壳蛋白上不存在的构象表位。

货号： PRAAV8 
数量：  96个测试

 

• 产品描述

 

背景:

*的微量滴定板酶免疫测定，用于定量完整的AAV8 wt病毒粒子，AAV8重组病毒体或人腺相关病毒8的组装和完整的空衣壳。捕获抗体检测未组装的衣壳蛋白上不存在的构象表位。

 

 

背景技术：

腺相关病毒(aav)是一种小型、无包膜病毒，其包装了线性单链dna基因组。aav属于细小病毒科(parvoviridae)和依赖病毒属(dependovirus)，因为aav的生产性感染仅在辅助病毒(例如，腺病毒或疱疹病毒)存在的情况下发生。即使在辅助病毒不存在的情况下，aav病毒(血清型2)也可以通过整合入宿主人基因组的19q13.4号染色体来实现潜伏。所述aav病毒是已知的能够位点特异性整合的哺乳动物dna病毒(daya和berns,clinicalmicrobiologyreviews,第583–593页(2008))。

为了让aav在临床上安全使用，已将aav在其基因组的几个位置进行了遗传修饰。例如，在许多病毒载体中，rep基因(其是病毒复制所需的)和位点特异性整合所需的元件已经从aav基因组中消除。这种重组aav(raav)以染色体外状态存在，并且整合到基因组dna中的效率非常低。因此，raav在宿主细胞中诱导随机诱变的可能性即使没有*消除也有所降低。由于这些特性和缺乏致病性，raav作为基因疗法载体在临床前和临床应用的多个方面显示出巨大的前景。新的血清型和自身互补载体正处于临床测试中。除了这些正在进行的载体开发以外，持续的努力还集中在可扩展的制造工艺上，所述工艺可以高效地产生高滴度的具有高纯度和高效力的raav载体。

尽管对设计高效、大规模的方法来纯化适合人施用的aav产物作出的努力已经很大，但是仍然需要更好的aav纯化方法。在aav的纯化过程中，宿主细胞培养基质中的各种其它蛋白质和物质可以被更高效地去除。因此，需要包括从最终aav产物中除去宿主细胞物质的步骤的aav纯化方法。

 

 

技术实现要素：

细胞培养中aav载体产生的特征是形成复杂的基质，所述基质包含来自破裂细胞的物质。具体而言，宿主细胞蛋白质、蛋白酶体、细胞碎片和潜在的病毒特异性受体通常存在于来自破裂细胞的物质中。所公开的方法包括以下步骤：在于生理学适用的ph下导致更高纯度的条件下，从最终aav产物中去除宿主细胞材料。

一方面，提供了纯化腺相关病毒(aav)的方法，所述方法包括：

(a)在允许含有aav的溶液中的aav与亲和树脂之间结合的条件下，将所述溶液装载到针对aav的亲和树脂上；

(b)进行至少两个洗涤步骤；以及

(c)从亲和树脂上洗脱aav。

在一些实施方案中，所述方法还包括使含有aav的溶液与阴离子交换剂接触，并在将含有aav的溶液装载到亲和树脂上之前，从阴离子交换剂中洗脱含有aav的溶液。

在一些实施方案中，洗涤步骤中的至少一个步骤包括将包含有机溶剂或去垢剂的缓冲液施加到亲和树脂。在一些实施方案中，缓冲液包含trishcl和盐。在一些实施方案中，缓冲液包含z氨酸、z氨酸-hcl、J氨酸-hcl、赖氨酸-hcl、牛磺酸、mes-na、bis-tris和n-乙酰基-d,l-se氨酸中的一种或多种。在一些实施方案中，盐是nacl。在一些实施方案中，缓冲液包含乙酸钠。在一些实施方案中，缓冲液包含氯化镁。在一些实施方案中，缓冲液包含trishcl和乙二醇。在一些实施方案中，缓冲液包含蔗糖和甘油之一以及J氨酸-hcl。在一些实施方案中，缓冲液包含牛磺酸和乙二醇。在一些实施方案中，缓冲液包含J氨酸-hcl、赖氨酸-hcl和z氨酸-hcl。在一些实施方案中，缓冲液包含trishcl和dmso。

 

 

 

 Name.          Product No.     Quantity
AAV1 Titration ELISA PRAAV1 96 tests

 

AAV2 Titration ELISA PRATV 96 tests
AAV2 Titration ELISA 2.0R PRAAV2R 96 tests
AAV3 Titration ELISA 2.0R PRAAV3R 96 tests

AAV5 Titration ELISA PRAAV5 96 tests
AAV6 Titration ELISA PRAAV6 96 tests
AAV8 Titration ELISA PRAAV8 96 tests
AAVrh10 Titration ELISA  PRAAV10 96 tests