assayquant用于靶标生物学和药物发现与开发的酶和抑制剂活性测定

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使用新型传感器-肽底物对酶和抑制剂活性进行荧光微孔板检测的强大组合

assayquant用于靶标生物学和药物发现与开发的酶和抑制剂活性测定

AssayQuant 的PhosphoSens ® 技术构成了其广泛的 400 多种*的酶和抑制剂检测产品组合的基础。每种检测都具有以试剂盒或散装传感器肽形式提供的新型传感器肽底物，并且作为相关的独立试剂家族，每个成分都经过仔细测试，以确保其经过优化以用于适用的检测。散装试剂以折扣价提供，适用于高通量或大容量应用。

我们提供两种检测形式：连续和终点/红色。两种格式都与 96、384 和 1536 孔板兼容，并产生与测量时反应混合物中磷酸化产物的量成正比的信号。在这两种情况下，效力结果均与基于细胞的检测结果一致，加速并改进了先导识别、表征、分析和优化研究，从而有可能更快地开发出更有效的药物。

两种分析形式都与广泛的 ATP 浓度（包括低至生理 [mM] 水平）*兼容，并使用生理 Mg ++、 Mn ++、 Ca ++离子浓度和源自已知底物的肽序列。使用我们的选择性 PhosphoSens 底物，可以使用粗制细胞或组织裂解物进行检测，提供更多生理环境，包括测量活细胞中形成的功能性复合物中激酶的活性。

                                                                                                                                                               

货号 品名 规格 品牌
CSKS-AQT0101 PhosphoSens Kit 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0734 BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0734 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0157 PEPTIDE SUBSTRATE 1mg AssayQuant
AQT0449 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT0733 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT0255B PEPTIDE SUBSTRATE 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0296B BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0296, Peptide substrate, 1mg net lyophilized 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0258B PEPTIDE SUBSTRATE 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0297B PEPTIDE SUBSTRATE 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0104 PEPTIDE SUBSTRATE 1mg AssayQuant
AQT0691 PLK1 1mg AssayQuant
AQT0515 Cysteine Sox Kinase Sensor 1mg AssayQuant
AQT0536 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT0297 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT0258 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT0001 PhosphoSensKit 1mg AssayQuant
AQT50 50mM(50*)Europium 15ml AssayQuant
CSKS-AQT0255B BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0255, Peptide substrate, 1mg net lyophilized 1mg AssayQuant
CSKS-AQT0459B BULK Cysteine Sox Kinase Sensor, AQT0459 , Peptide substrate, 1mg net lyophilized 1mg AssayQuant

 

连续测定

PhosphoSens 连续测定利用简单的添加和读取协议，提供实时动态测量的能力，以及直接的荧光强度测量。这些测定通过允许测量初始反应速率（测量为初始线性区域的斜率）来提供高准确度和精确度，通常在前 30-60 分钟内并包括许多数据点，每 30 秒到 2 分钟执行一次读数. 这种连续测定形式还允许校正化合物自发荧光，因为此背景信号不会随时间而变化，并且可以通过从总荧光（包括酶在内的所有成分）中减去背景信号（包括化合物和反应的所有成分）来校正，以确定每个时间点的净信号. 连续格式基本上与任何市售的能够进行动力学读数的荧光酶标仪以及相关的实验室自动化设备兼容。不需要停止溶液或淬火/显影步骤，最大限度地减少时间，同时最大限度地提高产量。 

终点检测

由于许多化合物库都包含自发荧光化合物，AssayQuant 提供的 PhosphoSens Red 分析允许在更长（>600 nm）波长下进行检测，具有相同的最大激发，并使用时间分辨荧光。我们建议在发射波长处使用 100 µs 的激发和检测延迟，采集时间为 300 µs，以避免来自反应混合物中荧光材料的信号污染，这些材料的寿命非常短（纳秒）。我们的终点检测使用与我们的连续检测相同的反应设置，一旦反应运行，将向每个孔中添加基于铕离子 (Eu 3+ ) 的试剂，以取代 Mg ++在螯合复合物中。Sox 荧光团的激发使铕发光敏感，产生最大 615 nm（红色）的光，可以使用标准滤光片进行测量。PhosphoSens Red 检测通常可以使用与连续格式相同的 PhosphoSens 底物。然而，一些高酸性底物（例如，那些常用于酪氨酸激酶的底物）可能会导致红色格式的低信噪比。为了解决这种情况，我们已经确定了替代传感器肽序列，这些序列允许优化 PhosphoSens Red 测定，信号与背景比为 2 或更高，提供 0.7 或更高的 Z' 值（0.5 被认为是好的）。在这些情况下，相同的序列可用于连续格式，

三个酶检测家族和一个强大的检测生成过程

除了我们的连续和终点/红酶和抑制剂活性检测外，AssayQuant 还提供三种不同酶家族的检测：蛋白激酶、蛋白磷酸酶和脂质激酶。如我们的技术页面所述，所有 AssayQuant 蛋白激酶和磷酸酶测定均基于使用基于荧光传感器肽的底物。使用脂质 (DAG) 底物的脂质激酶（二酰基甘油激酶或 DGK）目前仅作为 AssayQuant测试服务的一部分提供。