mediomics 1-1-1004说明书

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Bridge-It® S-Adenosyl Methionine (SAM) Fluorescence Assay Kit, 384-well format

 


货号：1-1-1004。类别：384 孔板, Bridge-It 检测, DNA 甲基化,神经科学, SAM。标签：384 孔，AdoMet，Bridge-It，S-腺苷蛋氨酸，SAM，SAMe。

描述

Bridge-It® S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 荧光检测试剂盒，384 孔格式

应用：

  • 定量生物体液、细胞培养和发酵培养基以及组织和细胞提取物中的 SAM 水平

  • 表观遗传学和甲基化研究

  • 许多神经和精神疾病，包括阿尔茨海默病、抑郁症、艾滋病毒相关的神经功能障碍/痴呆、多发性硬化症、帕金森病、脊髓退化、癫痫、纤维肌痛、偏头痛，以及慢性肝功能障碍、动脉硬化和癌症

 

特征：

  • 简单： 将测试样品或标准品与检测溶液混合并在 ~25°C 下孵育

  • 快速： 孵育 30 分钟后读取荧光信号

  • 灵敏： 测定法以 0.5 µM 的检测下限测量 SAM（即 96 孔中的 50 pmol/孔或 384 孔黑色微孔板中的 20 pmol）

  • 灵活： 检测适用于低通量和高通量筛选形式

 

 

S-腺苷蛋氨酸和 Bridge-It 荧光检测的背景信息

S-腺苷蛋氨酸 
S-腺苷甲硫氨酸（也称为 SAM、SAMe 或 AdoMet）在所有类型生物体的甲基化生物学过程中发挥着至关重要的作用。在甲基化循环中，SAM 充当甲基的供体，用于 DNA 和蛋白质的共价修饰。SAM 水平的变化与衰老过程、许多神经和精神疾病有关，包括阿尔茨海默病、抑郁症、HIV 相关的神经功能障碍/痴呆、多发性硬化症、帕金森病、脊髓退化、癫痫、纤维肌痛、偏头痛和还有慢性肝功能不全、动脉硬化和癌症。目前，SAM 使用高压液相色谱 (HPLC) 方法进行量化。HPLC 耗时、昂贵，而且由于需要大量的有机溶剂，

 

 

Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸荧光 (SAM) 检测1,2
Mediomics Bridge-It ®  S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 荧光检测方法基于成熟的荧光测量技术和我们获得的新型检测平台设计的结合它利用 DNA 结合蛋白作为它们各自的小分子共调节因子（配体）的生物传感器。DNA 序列特异性 MetJ 蛋白对其*的 DNA 结合位点的亲和力在其配体 S-腺苷甲硫氨酸的存在下大大增加。对于该测定，MetJ 共有序列被分成两个 DNA“半位点”。一半片段用荧光素标记，另一半片段用 Oyster ®  645 荧光团标记3,4。测试样品中 SAM 的相对量将影响测定中 DNA-MetJ 蛋白复合物形成的量。当这种复合物形成时，它会将荧光标记的 DNA 半位点靠近并导致荧光信号发射发生可测量的变化（增加），这可以使用酶标仪轻松测量（波长设置：吸收 485 nm；发射 665 nm ）。然后使用 SAM 标准曲线确定测试样品中的 SAM 浓度。Bridge-It ® SAM 荧光检测方法表现出非常理想的性能特征，包括高 (>6:1) 信号与背景 (S/B) 比、宽检测范围 (~0.4 µM – 100 µM) 以及 0.4 µM 的检测灵敏度。该检测水平 (0.4 µM) 可用于量化大多数感兴趣的测试样品中的 SAM，包括生物体液、细胞培养和发酵培养基以及组织和细胞的提取物。

与 HPLC 程序相比，Bridge-It ®  SAM 荧光检测方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此，它非常适合在大量测试样品中快速、同时测量 SAM 水平。此外，这种方法很容易适应目前用于药物发现研究的高通量筛选平台。