cube-biotech他的亲和力树脂和磁珠说明书
多组氨酸标签/Poly-His-标签是应用广泛的蛋白质亲和标签。由于其只有六个氨基酸的小尺寸，它很少干扰蛋白质的功能。此外，它在天然和变性条件下的低免疫原性和多功能性突出了这种蛋白质标签。His-tag 的基本纯化原理是金属离子与组氨酸咪唑环之间的相互作用。
His-tag 纯化树脂和磁珠：
选择正确类型的 His-tag 纯化树脂或磁珠基于三个因素：
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配体：这是金属离子在螯合剂复合物中偶联的分子（见图 1）。
Cube Biotech 提供三种不同的配体。-
NTA：次氮基三乙酸是常用的配体。它与镍的螯合剂络合物如图 1 所示。
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IDA：亚氨基二乙酸是第二常用的一种。单击此处了解IDA 和 NTA 之间的区别。
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INDIGO：这种配体是在 Cube Biotech 开发的。它的优点之一是大大提高了 DTT 和 EDTA 耐受性。单击此处了解有关 INDIGO的更多信息。
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偶联的金属离子：取决于与配体偶联的金属离子，His 标签纯化的亲和力和特异性会发生变化。经验法则：蛋白质产量越高，纯化的特异性越低。图 2 给出了用于 His-tag 纯化的常用金属离子的亲和力/特异性比率的一个概览。
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珠子的大小：使用的珠子直径越大，FPLC 纯化的流速越高。然而，具有较慢的流速通常会增加蛋白质产量。我们提供 30 µm、40 µm、100 µm 和 XL 尺寸（~400 µm）的珠子直径。可根据要求提供更多尺寸。参见图 3 以供参考。
His-tag 亲和树脂和 MagBeads 的详细信息：
图 1：由 NTA 和镍2+组成的螯合剂复合物的示意图。该镍离子与添加到蛋白质中的 His 标签的两个咪唑环结合。
图 2：His 标签蛋白纯化中常用的金属离子概述。铜的亲和力高，而特异性低。钴标志着光谱的另一端。镍是常用的金属离子，在亲和力和特异性之间具有良好的平衡。
PureCube 100 INDIGO 镍琼脂糖
产品信息“PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose”
| 类型： | 琼脂糖 |
| 珠子大小： | 100 µm（琼脂糖） |
| 亲和力： | 他的标签 |
| 目的： | 蛋白质纯化 |
| 配体： | 靛青 |
| 耦合离子： | Ni2+ |
PureCube 100 INDIGO-Ni 琼脂糖树脂是 Cube Biotech 为高质量的 His-tag 蛋白质纯化而开发的产品。其目的是创造一种琼脂糖树脂，能够承受高浓度的螯合剂，如 EDTA 和 DTT，这些螯合剂在哺乳动物细胞培养缓冲液中很常见。得到的 INDIGO 配体具有 20 mM 的 DTT 和 EDTA 公差。这远远优于其他竞争树脂。INDIGO-Ni 也可用作磁珠或预装在墨盒/柱中。