abeomics 14-131ACL说明书
Abeomics Inc. 致力于通过将科学家从常规的动手实验室工作中解放出来,帮助他们进行更具创造性的研究。我们通过提供定制和合同实验室服务来做到这一点,这些服务可以缩短您获得结果的时间,并让您更快地专注于下一步。Abeomics 由一群经验丰富的科学家组成,他们还创立了成功的企业,包括生命科学试剂和合同实验室服务提供商 IMGENEX Inc. 和 Protein Lounge,一个用于系统生物学和生物信息学。
TLR9/NF-kB Leeporter™ Luciferase Reporter-HEK293 Cell Line
TLR9/NF-kB Leeporter™ 萤光素酶报告基因-HEK293 细胞系
产品编号:14-131ACL
应用 : | 功能分析 |
数量 : | 1 瓶 |
内容 : | 每个小瓶在 1 ml 90% FBS + 10% DMSO 中含有 2 ~ 3 x 10^6 个细胞。 |
储存情况 : | 收到后立即储存在液氮中。 |
TLR9/NF-kB Leeporter™ 萤光素酶报告细胞系是稳定转染的 HEK 293 细胞系,在 NF-kB 反应元件的转录控制下表达全长人类 Toll 样受体 9 (TLR9) 和海肾萤光素酶报告基因. TLR9 是关键的先天免疫受体之一。细胞系的功能活性已通过 TLR9 配体测定得到验证,其中在被 CpG 激活后,TLR9 迅速启动下游信号通路并介导 NF-kB 的核转位(图 1)。
应用:
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监测 TLR9 信号通路活性。
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筛选 TLR9 信号通路的激活剂或抑制剂。
培养条件:
细胞应在 37 o C 和 5% CO 2 使用 DMEM 培养基(含 L-谷氨酰胺、4.5g/L 葡萄糖和丙酮酸钠)并添加 10% 热灭活 FBS 和 1% Pen/Strep 以及 2 µ g/ml 嘌呤霉素和 5 µg /ml 杀稻瘟菌素 (注意:在报告细胞分析期间可以省略嘌呤霉素和杀稻瘟素)。
建议在收到冷冻细胞后或在 37 o C 水浴 中从液氮中快速解冻,转移到含有 10 ml 不含嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的生长培养基的试管中,离心细胞,重悬细胞在预热的生长中不含嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的培养基,将重悬的细胞转移到 T25 瓶中,在 37 o C-CO 2 培养箱中培养。
将 T25 烧瓶放在培养箱中 1~3 天,不要干扰或更换培养基,直到细胞*恢复活力并贴壁。一旦细胞贴壁率超过 90%,去除生长培养基并通过胰蛋白酶消化和离心使细胞传代。在第一次传代时,切换到含有嘌呤霉素和杀稻瘟菌素的生长培养基。细胞在达到*汇合之前应该被分裂。
为了使细胞传代,用胰蛋白酶/EDTA 将细胞从培养容器中分离出来,加入完整的生长培养基并转移到试管中,旋转细胞,重悬细胞并将适当等分的细胞悬浮液接种到新的培养容器中。传代比例 = 每周 1:10 至 1:20。 为了获得满意的结果,细胞不应传代超过 16 次。