zymoresearch 5-FOA说明书

5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)

9001-1	5-Fluoroorotic Acid (powder)	1 g
F9001-5	5-Fluoroorotic Acid (powder)	5 g
F9003	100X 5-Fluoroorotic Acid (Liquid)	10 ml

强调

• 酵母遗传反选择剂：通常用于固化酵母菌株的质粒，质粒改组，等位基因置换和双重杂交筛选。
• 方便：可作为纯粉末或DMSO中的即用型溶液使用。
• 超纯：通过薄层色谱法（TLC），熔点和批次比较确定> 98％。

描述

使用5-氟乳清酸（5-FOA）进行酵母的反选择是一种常见的遗传筛选方法。质粒的酵母菌株固化，质粒改组，等位基因置换和双杂交筛选是可以利用5-FOA的方法。否则对酵母无毒，5-FOA在表达编码涉及尿嘧啶合成的牛磺酸5-单磷酸脱羧酶的功能性URA3基因的菌株中转化为有毒形式（即5-氟尿嘧啶）。表型上为Ura +的酵母菌株在选择后变成Ura-和5-FOA（R）（抗性）。使用超纯（<98％）5-FOA粉末的客户经常会提出5-FOA溶解度的问题，因为它在水中不溶。因此，我们提供了DMSO和合成的5-FOA一水合物粉末中的100X浓缩（100 mg / ml）5-FOA溶液。

技术指标

 

格式	合成的5-FOA一水合物粉末或100X液体（在DMSO中为100 mg / ml）
分子量	174克/摩尔
产品储存	储存在-20°C
纯度	TLC，熔点和批次比较≥98％（估计）
溶解度	在1毫升（1：1 1：1 NH 4 OH：H 2 O）中50毫克，缓慢加热；DMSO中> 100 mg / ml
结构体	C 5 H 3 FN 2 O 4 •H 2 O

产品信息

5- 氟硼酸 (5-FOA)

产品处方：

· 超纯粉末 > 98%： F9001-1 (1g) 和 F9001-5 (5g)

· 100X 溶液： F9003 (10 mL)

· 2X SC/5FOA（合成*葡萄糖培养基）： F9002 (250 mL)

 

亮点

¨ 易于使用的制剂。

¨ 证明具有大活性。

¨ 生物学试验。

¨ 稳定方便的反向选择选项。

 

 

 

目录 一般信息……………….…………	2
订购信息…………………	2
一般描述………………	3
方案……………………………………….	3

 

一般信息

专属性： 酿酒酵母、粟酒裂殖酵母和其他真菌种类含有

URA3 直系同源物。

 

· 分子式：C5H3FN2O4

· 稳定性：自购买之日起 1 年内保证质量。

 

内容物：

 

产品	数量/尺寸	储存	目录
超纯粉末：(> 98%)	1 g	-20o C	F9001-1
超纯粉末：(> 98%)	5 g	-20o C	F9001-5
100X 5-FOA（100 mg/mL DMSO 溶液）	10 ml	-20o C	F9003
2X SC/5-FOA（2 mg/mL，SC 培养基中）	250 ml	4o C	F9002

本产品仅供研究使用，只能由经过培训的专业人员使用。本试剂盒中包含的一些试剂具有刺激性。佩戴防护手套和护目镜。遵循您的研究机构或机构制定的安全指南和规则。

 

 

 

 

 

 

一般描述

 

 

 

 

 

5 FOA 介质方案

 

 

粉末：

 

1. 将标准酵母合成培养基制成 400 mL，加入 1g 5-FOA 粉末，过滤除菌。或者，培养基冷却至约 55 ℃ 后，在高压灭菌后加入 5-FOA 粉末。

 

2. 高压灭菌琼脂水（20 g/600 mL，带搅拌棒），冷却至约 55 ℃。

 

3. 向琼脂水中加入温热的含培养基的 5-FOA，混合并倾倒平板。

 

 

100X 溶液：

 

1. 按照您喜欢的实验室方法制备标准的含琼脂的酵母合成培养基。高压灭菌。加入搅拌棒以便于混合。

 

2. 冷却至约 55 ℃。加入任何热敏组分（氨基酸、糖或其他物质）。

 

3. 每升加入 10 mL 100X 5-FOA 溶液，混合并倾倒平板。

 

 

2X SC/5-FOA：合成*葡萄糖培养基

 

1. 配制 250 mL 琼脂水（5g 琼脂/250 mL），高压灭菌。包括搅拌棒，便于混合

 

2. 将 2X SC 5-FOA 培养基预热至约 55 ℃。

 

3. 向琼脂水中加入 2X SC/5-FOA 培养基，混合并倾倒平板。