mypols Volcano2G DNA聚合酶
Volcano2G DNA polymerase
Volcano2G DNA聚合酶
€95,00
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Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高级版本，具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种经过工程改造的，极耐热的逆转录酶和结合的DNA聚合酶，可通过定向的人工进化获得。Volcano2G DNA聚合酶可直接从RNA模板（无需等温逆转录步骤）直接促进“零步” RT-PCR，因为在循环PCR延伸步骤中逆转录与DNA扩增同时进行。这还允许在高温下进行逆转录反应，从而大程度地减少了在高温下融化的RNA中强大的二级结构所遇到的问题。
Volcano2G DNA聚合酶包含热启动剂配制的，具有逆转录酶活性的工程稳定的热稳定DNA聚合酶和稳健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于适体的热启动剂设计用于在低温下（例如，在移取反应混合物时）阻断非特异性DNA聚合酶活性，但会在高于50-55°C的温度下分解，从而释放出现已*活化的DNA聚合酶。
Volcano2G DNA聚合酶作为5 U / µl甘油库存与适当的5x Volcano反应缓冲液一起运输，该缓冲液针对60-300 bp的扩增子进行了优化。
Volcano2G逆转录酶可以可靠地从≥1 ng总RNA输入中检测RNA靶标。它不需要Mn 2+即可 获得宜活性。但是，可以通过向反应中添加Mn 2+来进一步优化某些检测方法（建议范围为0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。
该产品以凉爽包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。
RT-PCR活性：已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出一个151 bp的片段（HPRT1 mRNA），并可视化为单个扩增产物。
DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监测Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度通过蛋白质特异性染色确定。
带有“ 0步”方案的便捷RT-PCR
零步协议节省时间
跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。
Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶，非常稳定，在95°C下的半衰期> 40分钟。
灵敏的RNA检测
当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。
来自细胞的直接RT-PCR
为了可靠地进行细胞RNA的RT-PCR，样品制备步骤*。然而，这些步骤费力，费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液，您可以用快速便捷的“零步长”方案代替费力的RNA制备。
节省时间和金钱
VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤”工作流程，使您能够规避费力的纯化和提取步骤，从而节省了时间和金钱。
出色的灵敏度
VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA。
具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。