巨噬细胞去除实验

  去除巨噬细胞是研究巨噬细胞功能的重要方法。巨噬细胞可吞噬 clodronate Liposome， 在溶酶体的作用下，clodronate 可释放出来，当其达到一定浓度时，可引起巨噬细胞的凋亡， 从而去除巨噬细胞。clodronate Liposome 可局部注射去除注射部位临近的巨噬细胞，如肺、 膝关节、肿瘤局部和脑等；也可尾静脉或腹腔注射去除循环途径中的单核巨噬细胞，如肝脏 和脾脏中的巨噬细胞。
1. 脂质体的准备 可以自己制备或者购买商品话的脂质体 荷兰clodronaiposomes和美国Formumax Scientific公司都可以提供现成的商品化的高质量clodronate Liposome 具体信息如下
 
 
货号 品名 包装 价格 品牌   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含对照 去除率85% 2ml 2985 FormuMax   
F70101C-N Clodronate Liposomes 不含对照 去除率85% 10ml 10485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 对照 2ml 1485 FormuMax   
F70101-N Control Liposomes 对照 10ml 5235 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含对照 去除率85% 2ml 3585 FormuMax   
F70101C-NC Control Liposomes 含对照 去除率85% 10ml 12585 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含对照 去除率95% 2ml 4485 FormuMax   
F70101C-A Clodronate Liposomes 不含对照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含对照 去除率95% 2ml 5235 FormuMax   
F70101C-AC Clodronate Liposomes 含对照 去除率95% 10ml 15735 FormuMax   
Clodronate  Clodronate Liposomes and PBS Liposomes per 10ml 10ml 4500 clodronaiposomes 

2. 脂质体的体内注射 隔日尾静脉注射 200ul clodronate liposome，根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化 或流式检测巨噬细胞的去除效率。
尾静脉注射方法： 尾静脉注射方法：
 1. 将小鼠放在倒扣的饭盒内，从孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉，2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面，3 条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉；
2. 将纱布浸泡于约 70 度的温水中，拿出后包裹尾巴，以达到使尾部血管扩张及软化表皮 角质的目的；
3. 行尾部静脉注射时，以左手拇指和食指前后摁住鼠尾，留出约 2cm 一段，使皮肤紧张， 静脉更为充盈，右手持 1ml 针头注射器，使针头与静脉平行(小于 30°角)，从尾巴的下 1/4 处进针，开始注入药物时应缓慢，仔细观察，如果无阻力，无白色皮丘出现，说明 已刺入血管，可正式注入药物。
4. 有的实验需连日反复尾静脉注射给药，注射部位应尽可能从尾端开始，按次序向尾根部 移动，更换血管位置注射给药。拔出针头后，用棉球按住注射部位轻压 1-2min，止血。

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