laebio K007说明书

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laebio专注于新的亲和纯化蛋白和参与检测体外 Sumoylation活性的高度特异性抗体 。我们可以为您提供全套的SUMO化蛋白，包括SAEI / SAEII，UBC9，SUMO-1，SUMO-3，立即开始您的SUMO化检测。   为了筛选针对拓扑异构酶的抗肿瘤药物，我们提供人类DNA拓扑异构酶I，II 一，和II b，和他们的抗体。这些试剂包括TOPO I，TOPO II a，TOPO II b，TOPO I抗体F14，TOPO I抗体T8N，TOPO I检测试剂盒，TOPO  我药物筛选试剂盒，TOPO II 一抗体，和TOPO II b 抗体。我们还提供蛋白激酶A，DARPP-32，磷酸化DARPP-32，磷酸酶抑制剂-1，磷酸酶抑制剂-1，磷酸酶抑制剂-2，磷酸酶抑制剂-2抗体的催化亚基，为您研究多巴胺能功能。脑。

laebio K007说明书

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

Catalog＃K007提供蛋白质

 

描述：
该检测试剂盒含有用于常规检测SUMO化活性的试剂。包括Sumoylation标记（人拓扑异构酶I蛋白）以允许清楚地检测反应。已经证明该测定法适用于粗提物。强烈建议将人类EI，活性物质（Cat＃P001; P006），人类E II，活性物质（Cat＃P002; P011）和人类SUMO I，活性物质（Cat＃P003; P012）与此试剂盒一起使用。

K007套件包含：

  • SAE I和SAE II（人类EI）（Cat＃P006）
  • UBC9（人类E II）（Cat＃P011）
  • SUMO I（活动形式）。（Cat＃P012）
  • 人DNA拓扑异构酶I片段。（Cat＃B007）
  • 抗拓扑异构酶I抗体。（Cat＃AP006）（冻干的抗体应在使用前用100ul H 2 O 重构。）
  • 10X的SUMO化反应缓冲液。（Cat＃B006）（10x缓冲液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。）

上述试剂适用于50次SUMO化反应。

 

测定条件：
SUMO化测定在20微升的终体积中含有20mM的Hepes pH为7.5，5mM的氯化镁反应缓冲液中进行2，2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I Sumoylation Control Protocol：

  1. 加入2ul 50kd拓扑异构酶I片段（Cat＃B007）作为每个反应的底物。
  2. 在每个反应中，首先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反应缓冲液（Cat＃B006），2ul E1和2μl20mMATP。后，加入H 2 O使总体积达到20μl 。
  3. LAE SUMO化蛋白的反应浓度如下：
    • EI：7.5ug / ml
    • E II：50ug / ml
    • SUMO-1：50ug / ml

          为对照测定的推荐条件是37 ø 30〜60分钟c。。
     

  4. 在10 ml（Cat＃AP006）中使用1000倍稀释的提供的拓扑异构酶I抗体进行免疫印迹。应检测四个主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗体（cat＃AP006）的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白（cat＃B007）的Western印迹（12.5％凝胶）。泳道1：sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2：未经过酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗体（ Cat＃AP006）可检测至少四个主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol：

  1. 准备合适的纯化底物蛋白。
  2. 在每个反应中，首先向底物中加入2μlE2，然后加入2μlSy,2μl10μl反应缓冲液，2μlE1和2μl20mMATP。后，加入H 2 O使终体积达到20μl。
  3. LAE蛋白的反应浓度如下：
    • EI：7.5ug / ml
    • E II：50ug / ml
    • SUMO-1：50ug / ml

 

运输/储存：
此套件随附干冰，应储存在-70 o C或更低温度。  

法律考虑：仅供研究使用。