immuquest IQ213说明书

Anti-hnRNP K antibody [3C2] – ChIP Grade

抗hnRNP K抗体[3C2] – ChIP级

 

目录号：IQ213

£226.00

 

目标抗原

hnRNP K. 

 

主要说明

小鼠抗hnRNP K [3C2] – ChIP等级

 

目录编号

IQ213

 

数量

0.1毫升

 

浓度

1mg / ml的

 

克隆

3C2

 

主办

老鼠 

 

同型

IgG2b的

 

免疫原

全长天然蛋白质（纯化的）（人类）

 

骨髓瘤/融合伴侣

SP2 / 0

 

物种反应性

鼠标，大鼠，仓鼠，牛，人类，非洲爪蟾

 

纯化

蛋白质A.

 

格式

纯化的抗体（来自上清液）含有PBS 0.1％;Sodium azide

应用

WB，IP，ELISA，ICC / IF，流式细胞仪，ChIP /芯片，IHC（大鼠）

 

稀释液

宜抗体稀释应通过滴定确定，但作为指导尝试;

WB：1/1000。检测到约65 kDa的条带（预测分子量：51 kDa）

流式细胞：使用1μg106个细胞

ChIP /芯片：以分析依赖稀释度使用。PubMed：20673990

 

参考

高R等人。异质核核糖核蛋白K（hnRNP-K）通过诱导参与细胞外基质，细胞运动和血管生成的基因来促进肿瘤转移。J Biol Chem。2013年5月24日; 288（21）：15046-56。doi：10.1074 / jbc.M113.466136。Epub 2013年4月5日.ICC   / IF;  人类PMID：23564449

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Fukuda T等。hnRNP K与RNA结合基序蛋白42相互作用，并在应激条件下维持细胞ATP水平。基因细胞。2009年2月; 14（2）：113-28。doi：10.1111 / j.1365-2443.2008.01256.x。Epub 2008年1月6日  ICC / IF WB; 鼠标IP WB; 人类 PMID：19170760

Schulz M等人。外周血单核细胞的蛋白质组学分析：在类风湿性关节炎患者中观察到选择性蛋白质加工。J Proteome Res。2007年9月; 6（9）：3752-9。Epub 2007年8月17日  WB; 人类 PMID：17705417

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Yano M等人。通过p21 mRNA转录后调控，参与Hu和异质核核糖核蛋白K在神经元分化中的作用。J Biol Chem。2005年4月1日; 280（13）：12690-9。Epub 2005年1月25日  WB; 鼠标 PMID：15671036

聚（C）结合异构核核糖核蛋白复合物K蛋白的表征和一级结构。Matunis M（Cell.Biol，1992年1月）  PMID：1729596

 

数据库链接

Entrez Gene：528135牛

Entrez Gene：3190 Human

Entrez基因：15387鼠标

Entrez基因：117282大鼠

Omim：600712人类

SwissProt：Q3T0D0牛

SwissProt：P61978人类

SwissProt：P61979鼠标

SwissProt：P61980大鼠

Unigene：522257人类

Unigene：142872鼠标

Unigene：11854鼠

 

研究领域

染色质; RNA结合;

 

也称为

CSBP抗体; dC拉伸结合蛋白抗体; FLJ41122抗体;异种核核糖核蛋白K抗体; hnRNP K抗体; HNRNPK抗体; HNRPK抗体; HNRPK_HUMAN抗体;转化上调核抗体;转化上调核蛋白抗体;转化上调核蛋白抗体;转化上调的核蛋白抗体; TUNP抗体

 

 

本产品仅供研究使用。不用于治疗或诊断用途。

 

异质核RNA（hnRNA）的微粒复合物是高Mr的RNA分子的异质混合物，其在蛋白质合成过程中在细胞核中发生，具有细胞特异性和异质性的蛋白质。蛋白质组分可能在加工过程中起作用。 hnRNA对mRNA的影响

 

免疫荧光方案 – 甲醛固定

   1.从Tcunit收集细胞，并用吸力从培养皿中取出培养基。
   2.用1x PBS洗涤并取出。
   3.在室温下在轨道振荡器上将细胞在预热（37℃）对甲醛中孵育12分钟。
   4.去除PFA并在室温下在1x PBS中的0.5％Triton X-100中孵育5分钟。
   5.准备封闭试剂，这也是抗体稀释剂。
   6.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次，在轨道振荡器上洗涤4分钟/洗涤。
   7.在室温下用1％NCS和1x PBS封闭30分钟。
   8.准备一抗（50μl/盖玻片）和湿润染色室。
   9.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并短暂风干。
  10.在室温下在黑暗的染色室中与一抗孵育1小时。在此期间准备二抗。
  11.用1x PBS洗涤细胞5次（每个烧杯更换5个烧杯/ 5个计数）
  12。在室温下在黑暗的染色室中与第二抗体孵育1小时。
  13.用1x PBS洗涤细胞5次。
  14.登上达皮。

溶液（染色当天新鲜制备）。

    * 1x磷酸盐缓冲盐水。
    *封闭试剂：1x PBS中1％NCS（使用新鲜的10x PBS）。
    *固定液：3.5％对甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的热板上搅拌直至溶解。加入4滴IN HCl并检查pH指示条。PH值应为7.4。完成体积，d.H20至25ml，加入25ml 2xPBS。在添加到盖玻片之前检查pH值。

免疫荧光方案 – 甲醇/丙酮固定

   1.从TCunit收集细胞，并用吸力从培养皿中取出培养基。
   2.用1x PBS洗涤并取出。
   3.用冷甲醇：丙酮1：1在冰上固定细胞10分钟。
   4.制备阻断试剂，这也是抗体的稀释剂。
   5.取出固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3次，在轨道振荡器上洗涤4分钟。
   6.在室温下用1％NCS和1x PBS封闭30分钟。
   7.准备一抗（50？l /盖玻片）和湿染色室。
   8.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并风干约7分钟。
   9.在室温下在室温下与一抗孵育1小时，在染色室中避光。在此期间准备二抗。
  10.用1x PBS洗涤细胞5次（每个烧杯更换5次烧杯/ 5次计数）
  11。在室温下，在染色室的黑暗中与第二抗体孵育1小时。
  12.用1x PBS洗涤细胞5次。
  13.登上达皮。

溶液（染色当天新鲜制备）

    * 1x磷酸盐缓冲盐水。
    *封闭试剂：1x PBS中1％NCS（使用新鲜的10x PBS）。
    *固定液：甲醇：丙酮1：1冰冷。

Western Blotting Protocol

   1.将凝胶转移到PDVF或硝酸纤维素膜上
   2.将膜置于封闭缓冲液中的塑料托盘中搅拌1小时
   3.在洗涤缓冲液中冲洗
   4.在洗涤缓冲液和一抗中孵育1小时
   5.洗涤6次X用洗涤缓冲液洗涤5分钟
   6.在洗涤缓冲液和二抗中孵育1小时
   7.用洗涤缓冲液洗涤6X 5分钟
   8.检测（例如ECL，Amersham根据制造商的说明）

洗涤缓冲液
PBS + 0.1％Tween 20 

阻断缓冲液
洗涤缓冲液+ 5％奶粉

所用抗体的浓度取决于每种抗体，抗原的量和所用的检测方法。通常，稀释在稀释的几百倍稀释到几千倍的范围内，但通常必须凭经验确定。

 

研究领域
染色质RNA结合
研究
表征聚（C）结合异质核核糖核蛋白复合物K蛋白的基本结构 – Matunis M通过p21 mRNA转录调控参与Hu和异质核核糖核蛋白K在神经元分化中的作用 – Masato Yano等