DyLightTM 594
DyLight594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。相比较Texas Red而言,不仅更亮,而且具有更好的水溶性(图12)。另外,ProLong Gold 封片的细胞经DyLight 594标记显色,耐光性强于Texas Red,与Alexa 594相当(图13左)。Vectashield封片的细胞用DyLight 594和Alexa 594标记,耐光性弱于Texas Red(图13中)。然而含N-propyl gallate的PBS-90%甘油封片的细胞DyLight 594标记抗体,耐光性稍弱于其他标记抗体(图13右)。
图12. HEp-2细胞使用ANA一抗(BIO-RAD)与亮度相当的二抗标记.荧光显微镜下观察ProLong Gold (Invitrogen)封片的细胞。Nikon LABOPHOTNikon 荧光显微镜连接D-70 DSLR 摄像机,100×曝光拍摄的图片。图中Alexa和DyLight标记的细胞1s曝光所拍,Texas Red标记的细胞2s曝光所拍。其他封片剂处理的细胞获得类似的结果。
图13.以时间为横坐标,初始荧光强度的百分比为纵坐标绘制的图谱,HEp-2细胞以ANA(Bio-Rad)和各种山羊抗人IgG(H+L)的二抗标记。细胞分别用ProLong Gold(左)、Vectashield(中)、含N-propyl gallate的 PBS-90%甘油封片(右)。
JIR公司DyLight 594标记的二抗明显亮于其它红色染料标记的抗体。与 DyLight 549、Cy3或TRITC标记物相比,它与绿色标记染料表现出更大的色差。在可见光谱的深红色
区域内,DyLight 594标记二抗是所有免疫荧光实验中的选择。
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