Haematologic HCPC-0070说明书
HTI HCPC-0070
Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。
Haematologic HCPC-0070说明书
蛋白质C. Protein C
蛋白质C
的结构域表示蛋白质C的结构域结构，其中：GLA =含有γ-羧基谷氨酸残基的区域，EGF =含有与人表皮生长因子同源的序列的区域，AP =在酶原转化为释放后释放的活化肽。活性丝氨酸蛋白酶，催化域=含有丝氨酸蛋白酶催化三联体的区域。箭头表示在酶原激活期间被凝血酶蛋白水解切割的位点。
HCPC-0070 人体蛋白C
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尺寸 |
100微克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
通过显色测定法<0.5％aPC活性 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
BCPC-1070 牛蛋白C
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尺寸 |
100微克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
通过显色测定法<0.5％aPC活性 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
维生素K依赖性酶原蛋白C在肝脏中作为单链多肽合成，随后通过从前体分子中去除二肽（Lys-146和Arg-147）转化为二硫键连接的异二聚体（1） ，2）。在血浆中观察到痕量的单链形式。负责蛋白C与磷脂囊泡的钙依赖性结合的轻链含有11个γ-羧基谷氨酸（gla）残基，1b-羟基天冬氨酸残基和2个表皮生长因子（EGF）同源结构域。丝氨酸蛋白酶催化三联体位于重链中。人蛋白C易于从重链的COOH末端蛋白水解切割肽（Mr = 3000），产生称为β-蛋白C的改变形式。没有观察到α-和β-蛋白C之间的功能区别。在人蛋白C的重链Arg-12（牛的Arg-14）中的单个切割将酶原转化为丝氨酸蛋白酶，活化的蛋白C.这种切割由α-凝血酶和内皮细胞表面之间的复合物催化。蛋白血栓调节蛋白。与其他维生素K依赖性凝血因子相反，活化蛋白C通过催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血剂的作用。APC还通过与纤溶酶原激活物抑制剂形成复合物而促成纤维蛋白溶解反应。这种切割由α-凝血酶和内皮细胞表面蛋白血栓调节蛋白之间的复合物催化。与其他维生素K依赖性凝血因子相反，活化蛋白C通过催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血剂的作用。APC还通过与纤溶酶原激活物抑制剂形成复合物而促成纤维蛋白溶解反应。这种切割由α-凝血酶和内皮细胞表面蛋白血栓调节蛋白之间的复合物催化。与其他维生素K依赖性凝血因子相反，活化蛋白C通过催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血剂的作用。APC还通过与纤溶酶原激活物抑制剂形成复合物而促成纤维蛋白溶解反应。
如Haley等人所述，通过修改Walker程序（3），从新鲜的柠檬酸化牛血浆制备牛蛋白C. （4）。使用免疫亲和层析（5）和常规技术（4,9）的组合，从新鲜冷冻的柠檬酸化人血浆制备人蛋白C. 蛋白质C以50％（体积/体积）甘油/ H2O提供，应储存在-20℃。通过SDS-PAGE分析确定纯度，并使用基于显色底物的测定法测量活性。
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加载 |
人类蛋白质C，每个泳道1μg |
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缓冲 |
MOPS |
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标准 |
SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脱氢酶（51 kDa），酒精脱氢酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） |
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本土化 |
等离子体 |
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血浆浓度 |
4-5μg/ ml（人）（6） |
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行动方式 |
酶原; 丝氨酸蛋白酶活化蛋白C（APC）的前体 |
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分子量 |
62,000（人类）（7） |
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消光系数 |
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等电点 |
4.4-4.8（人类）（8） |
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结构体 |
两条链，Mr = 41,000和21,000，二硫键连接，NH2-末端gla结构域两个EGF结构域 |
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碳水化合物百分比 |
23％（人类）（7） |
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翻译后修改 |
十一个gla残留物（牛），九个gla残基（人），一个β-羟基天冬氨酸 |
- 1. Esmon，CT，Thromb进展。和Hemosts。，10,25（1984）。
- Stenflo，J.，Semin。在Thromb。和Hemostas。，10,109（1984）。
- Walker，FJ，et al。，Biochim。生物物理学。Acta，571,333（1979）。
- Haley，PE，et al。，J.Biol。Chem。，264,16303（1989）。
- Jenny，RJ，et al。，Prep。Biochem。，16,227（1986）。
- Griffen，JH，et al。，Blood，60,261（1982）。
- Kisiel，W.，et al。，Methods Enzymol。，80,320（1981）。
- Discipio，RG等，Biochemistry，18,899（1979）。
- Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
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