Haematologic HCPS-0090说明书

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

蛋白质S.

蛋白质S
的结构域表示蛋白质S的结构域结构,其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸残基的区域,EGF =含有与人表皮生长因子同源的序列的区域,TSR =凝血酶敏感区域,?=未知功能区域,取代维生素K依赖性丝氨酸蛋白酶中发现的催化三联体。

 

HCPS-0090 Human Protein S

Size

100 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

N/A

Shelf Life (properly stored)

12 months

 

 

蛋白质S是单链维生素K依赖性蛋白质,被认为在凝血和补体级联中起作用(1,2)。在血浆中循环的蛋白质S的大约60%与C4b结合蛋白(C4BP)复合。已经表明,g-羧基谷氨酸(gla)依赖性蛋白S与带负电荷的磷脂的结合可以起作用以在损伤后将C4BP浓缩在细胞表面。

在凝血系统中,蛋白质S起抗凝血辅因子蛋白的作用。在Ca2 +和磷脂囊泡(Kd = 6×10-9M)(3)存在下,活化蛋白C(APC)与蛋白S形成1:1的化学计量复合物。在蛋白质S的存在下,在血浆和未刺激的血小板表面观察到因子Va的速率和APC的因子VIIIa失活的适度增加(3-10倍)。与C4BP结合的蛋白S不具有APC辅因子活性。近,已经描述了增强蛋白S活性的另外的结合蛋白(4)。已经提出凝血酶对蛋白S的蛋白水解失活作为该系统中的调节机制。通过凝血酶的单次切割通过去除含有gla结构域的NH 2末端肽(Mr = 8000)来消除蛋白S辅因子活性。

蛋白质S的结构域结构类似于其他维生素K依赖性凝血因子的结构域结构,除了蛋白质S不具有催化三联体。蛋白S是单链蛋白,在NH2末端结构域中含有10个gla残基,在4个表皮生长因子(EGF)结构域中含有10个gla残基。

如Jenny等所述,通过常规方法(9)和免疫亲和层析的组合从新鲜冷冻血浆中分离人蛋白S. (5)。纯化的蛋白质S以50%(体积/体积)甘油/ H 2 O供应,应储存在-20℃。通过SDS-PAGE分析确定纯度。

 

加载

人蛋白S,每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

本土化

等离子体,游离并与C4BP络合

血浆浓度

10μg/ ml(免费)(6)

行动方式

Cofactor用于活化蛋白C.

分子量

69,000(7)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 9.5(7)

 

等电点

5.0-5.5(7)

结构体

单链,NH2-末端gla结构域,4个EGF结构域

碳水化合物百分比

7%(7)

翻译后修改

一个β-羟基天冬氨酸(8)十个gla残基(7),三个β-羟基天冬酰胺(8)

参考

  • 沃克,FJ,Semin。血栓。Hemostas。,10,131(1984)。
  • Dahlback,B.,et al。,Semin。血栓。Hemostas。,10,139(1984)。
  • Walker,FJ,J.Biol。Chem。,256,11128(1981)。
  • Walker,FJ,J.Biol。Chem。,261,10941(1986)。
  • Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
  • Dahlback,B.,Biochem。J.,209,837(1983)。
  • Discipio,RG等,Biochemistry,18,899(1979)。
  • Stenflo,J.,et al。,Proc。国家科。科学院。科学。美国,84,368(1987)。
  • Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,13,191(1983)。

 

 

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