Cytoskeleton，Inc。成立于1993年。从一开始我们就不断扩展我们的产品线。
Cytoskeleton，Inc。很高兴为药物筛选，信号转导和细胞骨架研究提供广泛的试剂盒和产品。我们专注于生产纯化蛋白质和易于使用的试剂盒，以研究生物化学和细胞过程。我们的试剂盒可用于少量样品，用于基础研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量样品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我们现有的产品，我们还在产品线中为微管，微管蛋白，运动蛋白，小G蛋白效应物，GAP，GEF和其他几种蛋白提供药物筛选服务。
Cytoskeleton BK163-S说明书
Signal-Seeker™乙酰赖氨酸检测试剂盒（10次检测）
量
10种检测方法（Cat。＃BK163-S）
Signal-Seeker™系列产品的开发旨在简化专家和非专业人士对关键调节蛋白修饰的分析。全面的Signal-Seeker™试剂盒提供亲和珠系统，可从任何给定的细胞或组织裂解液中分离和富集修饰的蛋白质。然后使用针对靶蛋白的抗体通过标准蛋白质印迹程序分析富集的蛋白质群体。
产品用途包括
- 调查瞬态监管机制
- 测量多种途径成员蛋白的信号传导事件
- 发现您感兴趣的蛋白质的新修改
- 深入了解监管机制
- 测量内源性或瞬时表达的蛋白质信号传导事件
套件内容
乙酰赖氨酸试剂盒包含以下组分：
| 裂解和蛋白质定量步骤 | IP和预清除步骤 | 洗步骤 | 洗脱步骤 | 西部一步 |
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BlastR™裂解缓冲液 BlastR™稀释缓冲液 BlastR™过滤器 蛋白酶抑制剂鸡尾酒 HDAC抑制剂鸡尾酒 Precision Red™蛋白质分析试剂 |
乙酰赖氨酸亲和珠 IP控制珠
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BlastR™洗涤缓冲液
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旋转列 珠子洗脱缓冲液
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化学发光试剂A. 化学发光试剂B. 抗乙酰赖氨酸-HRP抗体
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示例结果
这些套件有很多应用，这里我们描述一个有趣的例子：
应用1：调查显着的乙酰化事件
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使用Signal-Seeker™乙酰赖氨酸检测试剂盒进行免疫沉淀，与细胞信号传导乙酰赖氨酸抗体和免疫组化乙酰赖氨酸亲和珠相比较 图1.各种乙酰基 – 赖氨酸亲和试剂用于来自Cos-7细胞的IP乙酰化蛋白质，用TSA（1m M）和烟酰胺（1mM）处理（+）或未处理（ – ）6小时。（1）16.7 米 AAC04珠浆液（20升米克抗体）。（2）50 米 AAC04珠浆液（60升米克抗体）。（3）抗乙酰赖氨酸兔单克隆混合物（Cell Signaling，按制造商的说明书1：100）。（4）乙酰ImmuneChem赖氨酸亲和力珠（40 米克抗体）。（5）ImmunChem乙酰赖氨酸珠（80 米克抗体）。（6）正常小鼠IgG对照珠（60 米g抗体）。洗脱富集的乙酰化蛋白质的总曲线，并通过蛋白质印迹用AAC03-HRP抗体（1：3000）分析。AAC04在富集广泛的乙酰化蛋白质方面表现出色，而其他商业乙酰赖氨酸富集试剂主要富集丰富的乙酰化蛋白质（例如乙酰化微管蛋白和组蛋白）。 |
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使用Signal-Seeker™乙酰赖氨酸检测试剂盒免疫沉淀靶特异性乙酰化蛋白 图2A：使用BlastR缓冲液分离A431细胞，未处理（ – ）或用1m M TSA和1mM烟酰胺处理（+）6小时。使用AAC04珠（60m g）进行IP 。通过SDS-PAGE分离总细胞裂解物（输入）和免疫沉淀的样品，并通过蛋白质印迹用针对EGFR的抗体（Millipore，1：1000），Hsp90（Abcam，1：20,000），P53（Sigma，1：2000）进行分析，和RhoDGI（Millipore，1：1000） 使用Signal-Seeker™乙酰赖氨酸检测试剂盒从肝脏和心脏组织中免疫沉淀乙酰化蛋白 图2B：用BlastR缓冲液获得小鼠组织提取物（肝脏和心脏）。使用AAC04珠（60，进行IP 米 g）或mIgG对照珠（＃CIG02，60 米在组织提取物的1mg的克）。通过SDS-PAGE分离富集的蛋白质，并通过蛋白质印迹用AAC03-HRP（1：3000）分析。 |