BellBrook 3010-10K COA
Transcreener®ADP2 FP测定
部件编号3010-10K
批号13851
试剂盒组分列表和储存要求:
描述 |
部件编号 |
批号 |
组成 |
体积 |
储存条件 |
ADP Alexa633示踪剂,400 nM |
2013 |
13263I |
AlexaFluor®633标记示踪物,溶于2 mM HEPES(pH 7.5),0.01%Brij-35 |
1 mL |
-20°C |
ADP2抗体 |
2054 |
13278N |
3.2 mg/mL单克隆抗体的PBS溶液,pH 7.2,含10%甘油 |
3.6 mL |
-20°C |
终止和检测缓冲液B,10X |
2032 |
13734D |
200 mM HEPES、0.2%Brij-35、400 mM EDTA(pH 7.5) |
10 mL |
-20°C |
5 mM ADP |
2055 |
13703F |
5 mM ADP去离子水溶液,pH 7.0 |
2 mL |
-20°C |
5 mM ATP |
2056 |
13812B |
含5 mM ATP的去离子水溶液,pH 7.0 |
2 mL |
-20°C |
注:将试剂储存在-20 ℃下。单个试剂可耐受10次冻融循环。
1µM ATP下的抗体性能:
图1:[ATP]和[ADP2抗体]之间的线性关系。[ATP]和[ADP2抗体之间的关系呈线性。(尽管显示0.1µM和100µM ATP;但该关系对1,000µM ATP有效。)因此,可使用以下公式(y = mx)测定用于酶反应的ADP2抗体的量(使用0.1µM至1,000µM ATP)
+ b;其中10µL酶反应中x =[ATP](µM),y =[ADP2 抗体](µg/mL),10µL检测混合物中,m(斜率)
= 1.08,b(y轴截距)= 1)。我们建议终体积为20µL。
图2:1 MATP/ADP标准曲线。在酶反应缓冲液(50 mM HEPES(pH 7.5)、4 mM MgCl2、2 mM EGTA、0.01%Brij-35、1%DMSO、
和核苷酸),然后加入10 L含有2.1 g/mL ADP2抗体的ADP检测混合物。将反应在Corning®低体积384孔板(#4514)中孵育1小时,然后使用产品文献中所示的仪器设置在Tecan Safire2上读数。
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