EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基


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EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基


EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基是一种间充质干细胞(MSC)专用的外泌体(EVs)生产培养基。只要将EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添加剂,无动物源成分添加至EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基,无动物源成分中配成完全培养基即可使用。本品不含血清及动物源成分, 适用于多种组织来源的MSCs的培养。

 


◆特点


● 比血清培养基的外泌体分泌量高

● 培养的外泌体活性高

● 维持MSC的高存活率

 


◆适用细胞


适用于多种组织来源的MSC


细胞种类


骨髓来源的MSC,脂肪来源的MSC,脐带基质来源的MSC等

◆使用方法

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

*1:往EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基,无动物源成分(产品编号:053-09451)中添加了EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添

*1:加剂,无动物源成分(产品编号:298-84001)即为EV-Up™ 完全培养基

6孔板培养


1. 将各种间充质干细胞以5×103的密度来铺板,然后用增殖培养基(血清培养基或无血清培养基)培养至80-90%汇合。

2. 去除增殖培养基后加入4 mL EV-UP™完全培养基。培养3-5日。

3. 回收培养上清,2,000×g离心20分钟,用干净试管收集离心后的上清液,避免吸入沉淀。

※ 可在培养上清中添加1/100的EV-Save™ 细胞外囊泡吸附抑制剂来抑制试管或吸头等对EV的吸附。

4. 用MagCapture™ 外泌体提取试剂盒PS提取培养上清中的外泌体。

◆应用数据


外泌体粒子数


利用PS亲和法*1从各种培养基的培养上清液中提取外泌体,使用NanoSight的Nano Tracking Analysis技术对外泌体的粒子数进行分析。

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

*1:在金属离子的存在下,结合分子通过磷脂酰丝氨酸(PS)捕获细胞外囊泡后,再使用螯合剂洗脱的方法。

*1:使用MagCapture™外泌体提取试剂盒PS时,可以通过本方法进行外泌体提取。

*2:Exosome-Depleted FBS

FUJIFILM Wako研发的EV-Up™ 完全培养基,在培养MSC时,释放的外泌体粒子数是D-MEM+10% EV depleted FBS培养的2.6倍左右。另外,FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基与血清培养基相比,可以分泌更多的EV。

抗纤维化活性


用TGFβ刺激培养人胎肺成纤维细胞(TIG3细胞),用PS亲和法从不同培养基的培养上清中提取EV,取5×107 particles/mL提取出的EV,用RT-PCR对纤维化标记物(Collagen III,αSMA)的基因表达水平进行定量,以比较抗纤维化活性。

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

使用FUJIFILM Wako研发的EV-Up™ 完全培养基的EV,强力抑制了由TGFβ引起的纤维化相关基因的表达。由此可见,FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基能培养出的外泌体活性更高。

 


细胞存活率


将在血清培养基中扩增培养的人骨髓来源的MSC用不同培养基培养5天,然后检测产生外泌体后的细胞存活率。

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

FUJIFILM Wako 的EV-Up™ 完全培养基培养的MSC与D-MEM+10% EV-depleted FBS相比,具有同样高的细胞存活率。

外泌体标志物蛋白表达


用PS亲和法从培养上清液中提取外泌体,并通过ELISA检测标记蛋白CD9、CD63和CD81的表达。

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

EV-Up™ 间充质干细胞专用外泌体生产用培养基

FUJIFILM Wako的EV-Up™ 完全培养基与其他血清培养基相比,不同外泌体标记分子的表达更好。

◆产品列表


EV-Up™ MSC专用外泌体生产用培养基

产品列表

产品名称

规格

包装

053-09451

EV-Up™ EV Production Basal Medium for MSC, AF

EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用基础培养基,

无动物源成分

for Cell Culture

95 mL

298-84001

EV-Up™ MSC EV Production Supplement, AF

EV-Up™ 间充质干细胞外泌体生产用添加剂,

无动物源成分

for Cell Culture

100 mL

外泌体防吸附&冻结保护试剂

产品列表

产品名称

规格

包装

058-09261

EV-Save™ Extracellular Vesicle Blocking Reagent
EV-Save™ 细胞外囊泡吸附抑制剂

for Genetic Research

1 mL

外泌体提取和纯化试剂

产品列表

产品名称

规格

包装

299-77603

MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS
MagCapture™外泌体提取试剂盒PS

for Genetic Research

2 tests

293-77601

10 tests

290-80301

PS Capture™ Exosome Isolation Resin Kit
PS Capture™外泌体提取树脂试剂盒

for Genetic Research

1 kit
(0.5 mL浆状)

294-84101

MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS Ver.2
MagCapture™外泌体提取试剂盒PS Ver.2

for Genetic Research

2 tests

290-84103

10 tests


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