|
■ 制品内容 (5 μl反应体系,100次量) |
Lysis Buffer (4X) |
150 μl |
Recombinant RNase Inhibitor (40 U/μl) |
30 μl |
RT dT Primer 2 |
12 μl |
dNTP Mixture (2.5 mM each) |
12 μl |
MgCl2 (22.5 mM) |
36 μl |
RT Enzyme Mix 2*1 |
36 μl |
Exonuclease I (5 U/μl) |
72 μl |
TdT Buffer (5X) |
144 μl |
dATP (90 mM) |
24 μl |
TdT Enzyme Mix*2 |
54 μl |
PCR Primer Mix 2 |
300 μl |
RNase Free dH2O |
1 ml |
|
*1 含有PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor。 *2 含有Terminal Deoxynucleotidyl Transferase、RNase H。 |
|
|
Limited Use Label License:[L54] |
|
■ 制品说明 |
本制品是从少数细胞直接反转录合成cDNA,然后对反转录的cDNA进行扩增的试剂盒。扩增的cDNA可以作为Real Time PCR的模板使用。通常情况下,进行微量核酸提取时,纯化过程中核酸会有所损失,使用本制品不需要对细胞RNA和反转录的cDNA进行纯化,即可对反转录的cDNA高效扩增。 使用本试剂盒首先溶解细胞,然后使用dT Adaptor Primer(RT dT Primer 2)进行反转录反应,由mRNA合成cDNA,通过TdT酶对合成的cDNA进行dA加尾反应后,以此作为模板进行PCR反应扩增cDNA。 本制品除了能从少数细胞直接进行cDNA扩增外,也可以对微量的RNA进行cDNA扩增。 本试剂盒还添加了Exonuclease I 的处理步骤,能够抑制引物的非特异性扩增,并且提高低表达水平基因的扩增产量。 |
|
■ 保存 |
-20℃。 |
|
|
■ 注意事项 |
1. 为了保证反应液配制的准确性,进行各项反应时,应先按反应数+1的量配制Master Mix,然后再分装到每个反应管中。因为反应体系比较小,建议每次反应至少要配置5个反应以上的Master Mix。 2. 各步反应结束后,反应管放在冰上冷却,轻微离心后再进入下一步操作。 3. 请使用0.2 ml的Microtube和PCR仪进行反应。 |
|
|
|