本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行，操作简单，并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测，大大提高了检测灵敏度，并省略了PCR反应后的电泳步骤，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS，能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。
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| ■ 保存 |
-20℃。
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| 2X One Step TB Green RT-PCR Buffer Ⅲ 请于-20℃避光保存。 |
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| ■ 试剂盒特长 |
1. 进行Real Time One Step RT-PCR反应，可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。
2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS，可以进行Hot Start法PCR反应，再与Takara公司特别开发的Buffer系统相结合，具有高扩增效率，高扩增灵敏度之特点。2X One Step TB Green RT-PCR Buffer III中预先混有TB Green等，反应液配制十分简单方便。 |
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| ■ 使用注意 |
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT enzyme Mix Ⅱ时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 2X One Step TB Green RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等，尽量避免污染。
5. 制品只能使用特异性反转录引物，不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。
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