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| ■ 制品内容 (Code No.: 2240A) |
| DNA Topoisomerase I (20 U/μl) |
100 U |
| 10X DNA Topoisomerase I Buffer |
1 ml |
| 0.1% BSA* |
1 ml |
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| * BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。 |
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| ■ 制品说明 |
DNA Topoisomerase I 催化4种反应：
1. 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
2. 在单链环状DNA分子内形成绳结 (Knotting) 和解开绳结 (Unknotting)。
3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应 (Catenation) 或者逆反应 (Decatenation)。 本酶由于来源于小牛胸腺，与来源于原核生物的酶性质不同，即使在Mg2+不存在的条件下也显示活性。而且，原核生物由来的DNA Topoisomerase I 只作用负链的超螺旋分子，而本酶则能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Calf thymus |
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| ■ 活性定义 |
| 在37℃、30分钟内把0.5 μg/50 μl的超螺旋pBR322 DNA完全转换成松散型的酶的活性定义为1 unit。 |
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| ■ 使用注意 |
| pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I (超螺旋分子) 用DNA Topoisomerase I 处理后电泳，胶中含溴乙锭 (EtBr) 时，反应前后DNA条带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响，再次变为超螺旋状态。因此，使用Topoisomerase I反应后，一般使用不含EtBr的琼脂糖凝胶电泳，电泳终了后再用EtBr染色。 |
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