本酶具有作用于双链DNA的3’→5’外切酶活性。本酶对双链结构具有高度特异性，能降解平滑末端、3’凹陷末端及有切口的DNA，但是不能降解3’-突出末端。所以，可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解 (Double digestion) 后，利用Exonuclease III的3’→5’的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5’-P单核苷酸。
与BAL 31 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的删除制作。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Escherichia coli BE257/pSGR 3 |
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| ■ 活性定义 |
| 以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。 |
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| ■ 用途 |
1. 通过部分降解双链DNA片段，产生一部分单链DNA片段，作DNA聚合酶的底物。生成的DNA可用于双脱氧法序列分析。
2. 与单链特异性核酸酶 (S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease) 合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性，对于双酶切DNA片段 (例如EcoR I-Pst I Fragment) 能制作单向 (EcoR I 方向) 缺失的DNA。
3. DNA-蛋白质相互作用分析。 |
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| ■ 使用注意 |
1. 存放6个月以上应置于-80℃保存。
2. 该酶在性质上有这样一个特点：DNA即使具有3’突出末端，有时也因其末端及序列的不同而被作为底物降解。
例如：
一个碱基突出型 (Eam11051 I等)
二个碱基突出型 (Pvu I、Sac II等)
三个碱基突出型 (Sfi I等)
四个碱基突出型 (Apa I被确认，Ban II及BstX I也有可能)。 |
