SP6 RNA Polymerase酶试剂盒Takara

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SP6 RNA Polymerase
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Takara 2520A SP6 RNA Polymerase 3,000 U ￥701 SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase
Takara 2520B (A × 5) SP6 RNA Polymerase 3,000 U × 5 ￥3,154 SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase
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■ 制品内容
SP6 RNA Polymerase (50 U/μl) 3,000 U
10X SP6 RNA Polymerase Buffer 1 ml
100 mM DTT 1 ml
0.1% BSA 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是鼠伤寒沙门氏菌LT2的噬菌体SP6 DNA编码的酶，分子量为96,000。本酶以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA对SP6启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage SP6 RNA polymerase gene
 
■ 活性定义
在37℃、pH7.5的条件下，1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。
3. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物，制作Capped mRNA。
 
■ 使用注意
1. 最适pH为7.5，需要Mg2+和还原剂的存在，添加BSA及亚精胺可提高酶的活性。
2. 最适反应温度为40℃ (此时酶活性为37℃时的130%)，当所用酶量不超过300 U/ml，模板量不超过0.1 mg/ml时与RNA的合成量呈正比例。
3. 为了特定领域的有效转录，建议在其领域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
4. 缓冲液中所含亚精胺容易与核酸形成复合物产生不溶物，建议最后加入DNA模板。