T4 RNA Ligase酶试剂盒Takara

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T4 RNA Ligase
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Takara 2050A T4 RNA Ligase 1,000 U ￥521 T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase
Takara 2050B (A × 5) T4 RNA Ligase 1,000 U × 5 ￥2,343 T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase
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■ 制品内容
T4 RNA Ligase (40 U/μl) 1,000 U
10X T4 RNA Ligase Buffer 1 ml
0.1% BSA 1 ml
 
■ 制品说明
本酶能使寡核苷酸的5’-P末端和3’-OH末端结合，以ATP为辅因子。最小底物为NpNpNOH和pNp。连接效率受供体和受体各自的碱基影响。DNA与RNA之间的连接效率较RNA之间的连接效率低，DNA之间的连接效率最低，常因不能识别双链核苷酸导致连接失败。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid encoding T4 RNA ligase gene
 
■ 活性定义
以Oligo(A)n为底物，标记RNA 3’末端，在5℃、10分钟内使1 pmol [5’-32P]pCp 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
 
■ 用途
1. 单链RNA及单链DNA的3’-OH末端的标记。以tRNAPhe为底物，50 units的本酶于5℃反应16小时，tRNAPhe的3’-OH标记率高于80%。
2. 单链Oligo RNA及单链Oligo DNA的合成。
 
■ 使用注意
1. 连接反应的适合反应温度为5-16℃，若超过该温度活性会被抑制。
2. PEG共存的条件下能够促进反应，而反应特异性不变。
3. 为了提高连接反应效率，建议使用酶浓度高而ATP浓度尽量低的反应条件。