E.coli DNA Ligase酶试剂盒Takara

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E.coli DNA Ligase
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Takara 2161 E.coli DNA Ligase 1,000 U ￥161 E.coli DNA Ligase E.coli DNA Ligase E.coli DNA Ligase
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■ 制品内容
Code No.: 2161  
E.coli DNA Ligase (60 U/μl) 1,000 Units
10X E.coli DNA Ligase Buffer 100 μl
10X BSA (0.05%)* 100 μl
* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
本酶催化相邻DNA链的5′-P末端和3′-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，与T4 DNA Ligase作用相同。分子量为77,000，最适反应pH为7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。反应需NAD作辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。与T4 DNA Ligase能将DNA的5′-P末端与RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端与DNA的3′-OH连接不同，本酶不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli UT481 carrying the plasmid encoding the ligase
 
■ 活性定义
在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λ DNA-Hind III在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位 (U)。
 
■ 用途
Okayama-Berg法克隆cDNA，实验操作中酶的用量约为50 units。
 
■ 使用注意
本酶由大肠杆菌克隆体精制而成，杂质很少，是纯度很高的制品。因此，即便是高浓度制品，大量使用也完全没有问题。