本制品作为使用RNAiso Plus或NucleoSpin RNA Plant进行RNA提取的辅助试剂,可以高效地从植物材料(如块根作物、水果和种子等)中提取高纯度的Total RNA。由于本制品中含有高分子聚合物,能够有效地与组织样品中的多糖多酚结合,并可以在之后的离心步骤中除去。因此,当单纯使用RNA提取试剂盒很难提取植物RNA时,可使用本制品进行高效提取。 与RNAiso Plus结合使用时,将本制品加入样品之中并混合均匀,然后离心除去不溶物。向上清液中加入等体积的RNAiso Plus,再加入氯仿并混合均匀。离心后溶液分为三层,取最上层进行异丙醇沉淀回收total RNA。所有total RNA提取过程在1小时之内完成。 与NucleoSpin RNA Plant结合使用时,将本制品加入样品之中并混合均匀,然后离心除去不溶物。向上清液中加入RA1(或者RAP),充分混合后使用NucleoSpin Fliter除去不溶物。向flow-through内加入70%乙醇调制成lysate,利用附有silica membrane的cartridge离心回收total RNA。全部操作只需要30分钟。得到的total RNA可用于RT-PCR、Northern blot分析或mRNA的纯化。 以下植物(部分组织)使用本制品提取RNA,回收效率得到了提高。 <本制品对如下植物(部分组织)RNA的提取有效果> 樱桃番茄(果实),香蕉(果肉),草莓(果实),番茄(种子),水稻(种子),马铃薯(根茎),橘子(果皮),菠萝(叶片),芦荟(叶片),芒果(果实),拟南芥(种子),菊(叶片),蔷薇(叶片)。 【注】本制品适用于多糖多酚含量较高的植物。由于植物种类的不同,使用本制品也可能出现没有改善效果或total RNA回收效率降低的情况,因此,在对上述植物以外的植物进行实验时需要尝试。 |
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■ 保存 |
室温保存。 *20℃以下保存可能会出现沉淀,使用前请于37℃溶解沉淀。 |
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■ 植物RNA提取操作流程图 |
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