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■ 识别位点 |
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■ 制品内容 |
□ 附带缓冲液 |
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10X QuickCut Buffer |
1.5 ml×2 |
10X QuickCut Green Buffer |
1.5 ml×2 |
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■ 制品说明 |
□ 起源:Escherichia coli RY13 |
□ 反应温度:37℃ |
□ 活性测定用底物:λ DNA |
□ 活性检测:1 μl QuickCut限制酶在50 μl 1X QuickCut Buffer或1X QuickCut Green Buffer的反应体系中,在37℃条件下,经过5 min反应,将1 μg λ DNA 完全消化所需要的酶量。 |
□ 甲基化的影响:根据识别序列后续碱基的不同,有时受CG methylase影响。 |
□ Star活性:高甘油浓度、Mn2+存在、低离子强度条件下,识别序列会发生变化。如果在反应液中添加Spermine (0.2 mM左右),活性降低20~30%,但可以抑制30~50%的Star活性。 |
□ 使用注意: 1) 不建议进行1 hr以上酶切,易导致星活性。 2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时,加入限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量;如果各酶的反应温度不同,建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。 3) 10X QuickCut Green Buffer可能会干扰酶切产物的荧光分析。因此,酶切产物荧光分析检测时推荐使用无色的10X QuickCut Buffer。 4) 10X QuickCut Green Buffer如出现沉淀,室温下振荡5分钟可使沉淀完全溶解,不影响使用。 |
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