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■ 制品内容 |
Brevibacillus Expression System – BIC System (Code No.: HB300) |
1、pBIC DNA Set (Code No. HB310) |
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pBIC1 DNA |
5 μg (100 ng/μl) |
pBIC2 DNA |
5 μg (100 ng/μl) |
pBIC3 DNA |
5 μg (100 ng/μl) |
pBIC4 DNA |
5 μg (100 ng/μl) |
Control (Insert DNA) BLA |
1 μg (80 ng/μl) |
2、Competent Cells(Code No. HB116) |
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Brevibacillus Competent Cells |
100 μl × 10 |
MT medium |
1 ml x 10 |
Solution A |
1 ml |
Solution B |
1 ml x 2 |
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Limited Use Label License: [L39] |
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请先确认产品专利信息,订购时请填写专利确认书。 |
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■ 保存 |
1、pBlC DNA Set |
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pBIC1~pBIC4 DNA |
-20℃ |
BLA |
-20℃ |
2、Competent Cells |
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Brevibacillus Competent Cells |
-80℃ |
Others |
-80℃ |
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■ 制品说明 |
Brevibacillus Expression System是生产分泌型蛋白质的有效系统,非常适用于真核细胞重组蛋白质表达。Brevibacillus choshinensis 是革兰氏阳性菌,适用于异源蛋白质表达,并能生产高产量的有活性的蛋白质。本系统有如下优点: ·生产大量的胞外分泌型蛋白质; ·基因操作简便,易于培养; ·蛋白酶活性非常少; ·生产有活性的蛋白质; ·安全的宿主菌。 无论是哪种基因来源(细菌、古细菌或真核细胞),本系统都可以获得高表达的具有生物活性的蛋白质(酶、抗原和细胞因子)。尤其是,真核分泌型蛋白质常包含有二硫键,在原核表达系统中很难生产,而B. choshinensis Host-Vector System能生产高产量的分泌型蛋白质,包括含有二硫键的蛋白质。 高转化效率的Brevibacillus 使得目的基因克隆更简便。BIC (Brevibacillus in vivo Cloning)方法是通过将PCR片段和载体DNA混合,然后将混合物转化到宿主菌中构建表达质粒。 |
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■ BIC法原理 |
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编码目的蛋白质的DNA片段通过PCR扩增获得,且两个末端带有与线性载体末端相同的15 bp同源序列。PCR产物与线性载体混合后转入感受态细胞中。在细胞内,同源序列重组形成表达质粒。 由于在接近线性载体末端的位点也可能发生重组反应,因此,有可能构建的胞内表达质粒会缺少分泌信号或者用于直接分泌表达的质粒缺失His-Tag序列。 |
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■ 载体图谱 |
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