Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP)酶试剂盒Takara

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Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP)
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Takara 7340 Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) 50 μg ￥1,292 Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP)
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Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP)
□ 比活性 ＞8 U/mg
□ 酶浓度 1 mg/ml
□ 贮存溶液  
     N-Ethylmorpholine-AcOH (pH 8.0) 50 mM
□ 5X 反应缓冲液
     N-Ethylmorpholine-AcOH (pH 8.0) 250 mM
     CoCl2 0.5 mM
 
■ 制品说明
Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) 是一个特别的外切型氨肽酶，它能从蛋白质和肽的N末端上，依次水解释放酰基修饰基及后面的氨基酸，具有广泛的底物特异性。有些N末端被修饰的蛋白质或肽不能使用常规方法解析时，可以使用该酶对其N末端或N末端附近区域进行解析。由于通过基因工程方法对该酶的N末端进行了乙酰基保护，它的氨基酸序列不能用Edman 降解法解析。所以，即使E/S (酶/基质) 比较高时 (例如，E/S=1/2-1)，目的蛋白质或肽的氨基酸序列也可被特异性地解析。
 
■ 保存
-20℃。
一旦解冻，酶保存于4℃。酶和bufffer可在4℃稳定保存3个月。
 
■ 起源
由编码Pyrococcus Furiosus DAP 基因的质粒在酵母菌中表达。
 
■ 反应性
从蛋白质和肽的N末端上依次水解释放酰基保护基及后面的氨基酸。但不能水解X-Pro结构的肽键。Co2+能显著提高本酶活性。
 
■ 活性定义
在75℃，pH 8.0 的条件下，1分钟水解1 μmol 的Leucine-p-nitroanilide所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 特性
分子量：38,639 (质谱)
        451,000 (通过沉降平衡方法)
激活剂：CoCl2
抑制剂：Amastatin，EDTA
最适pH：pH6.5 – 9.0
最适温度：85 – 95℃
热稳定性：经证实，酶在提供的缓冲液 (pH8.0，0.1 mM Co2+) 中50℃保温48小时后仍有100%活性。
 
■ 注意事项
本酶不能作用于具有高级结构的蛋白质，蛋白质样品需进行CM化等的化学方法变性处理。此外，本酶不作用于结合在PVDF膜上的蛋白质。