| 磷蛋白磁珠试剂盒 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格（元） | 说明书 | 数量 |
| Clontech | 635641 | TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit | Each | ￥5,382 |  |
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| ■ 产品描述 | |||||
| 本产品结合了TALON-磷酸化蛋白质富集试剂盒的磷酸特异性和磁珠分离法的便利性，与磁力架搭配使用，可为从哺乳动物细胞和组织中提取mg量的磷酸化蛋白质提供了简单快速的基于金属亲和的方法。 | |||||
| 分离胞质蛋白质和膜结合蛋白质 | |||||
| 试剂盒中包含磷酸化蛋白质富集磁珠和一整套的buffer，能够对含有磷酸化氨基酸侧链（包括丝氨酸，酪氨酸或苏氨酸）的所有类型磷酸化蛋白质（包括细胞质蛋白质和膜结合蛋白质）进行组特异性富集。 | |||||
| 提取/上样buffer中含有非离子型去污剂用于提取胞内蛋白质，洗涤buffer和洗脱buffer不含去污剂。如果需要，可以使用pH9.0的buffer洗脱磷酸化蛋白质，这对有些类型的下游应用更加合适。。 | |||||
| 小体积洗脱液的微量蛋白质纯化 | |||||
| 试剂盒中的磁珠是以5%悬液的形式提供的，已经证实每ml悬液可结合400 μg的α-酪蛋白。磁珠的用量需要根据起始样品的浓度进行调节，富集的磷酸化蛋白质可以通过小体积的洗脱液(50-200 μg)洗脱，以便获得较高浓度的产物。 | |||||
| 对磷酸化蛋白质的高选择性 | |||||
| 在细胞的所有蛋白质中，只有少部分蛋白质会被磷酸化，因此在进行研究之前对磷酸化蛋白质进行富集是非常有必要的。TALON® PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可用于任何种类的哺乳动物或组织样品，实际得到的磷酸化蛋白质的产量根据细胞系的不同而不同。 | |||||
| ■ 产品特点 | |||||
| · 用于微量磷酸化蛋白质纯化的金属亲和方法，操作简单 · 可以从任意种类的细胞或组织样品中简便快速的进行富集操作 · 非变性的实验条件维持了蛋白质的构象和溶解性 · 洗脱得到的产物是小体积应用的理想选择 |
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| ■ 应用 | |||||
| 提取和富集所有种类的磷酸化蛋白质 | |||||
| ■ 实验例 | |||||
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| 使用TALON PMAC Magnetic Phospho Enrichment Kit可以高效富集磷酸化蛋白质。使用含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂（10 mM氟化钠）的提取/上样buffer从HEK 293细胞中提取蛋白质，然后与200 μl的磁珠混悬液室温混合30 min，洗涤、洗脱。将各组分电泳并使用对应的磷酸化蛋白质特异性抗体（图A是AKT (Ser 473)，图B是P-AKT (Thr 308) ，图C是P-PTEN (Ser 380) ，图D是P-GSK3 beta (Ser 9)）做Western Blotting检测，Lane1是提取产物，Lane2是流穿液，Lane3是洗脱液。图D的51 kDa条带是由于抗体与P-GSK3a交叉反应的结果。 | |||||
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