磷酸肽离心柱 | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Clontech | 635635 | Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit | Each | ¥1,714 |
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■ 产品描述 |
我们的Phosphopeptide Enrichment Spin Columns 和 Phosphopeptide Enrichment Buffer Kit能够增强对一些很难检测的磷酸化肽段的检测能力。简单的实验操作可以帮助实验人员在做质谱或HPLC检测之前富集蛋白质消化片段。 |
离心柱使用的是能够结合磷酸肽的特别的IMAC树脂,可以从哺乳动物细胞和组织中分离磷酸肽,最高可结合250 μg的磷酸肽并且可以容纳高达850 μl的样品量。离心柱与大多数离心机都可以良好匹配,使用时无需预平衡,直接离心去除储存buffer即可。 |
试剂盒中提供优化的上样buffer和洗脱buffer,可以得到理想结果,buffer的量足够与25个离心柱配套使用,无需费时自行配制。 |
■ 产品特点 |
· 可有效、特异性地富集所有种类的磷酸肽——磷酸化酪氨酸,磷酸化丝氨酸,磷酸化苏氨酸 · 使用方便的预装柱 · 在质谱分析中获得更高的灵敏度 |
■ 应用 |
富集磷酸肽 |
■ 实验例 |
上图为使用本制品离心柱纯化β-酪蛋白磷酸肽的结果。首先使用trypsin(测序级别)消化β-酪蛋白,消化产物以1:1的比例用Loading Buffer稀释,然后使用本离心柱进行纯化,后用Elution Buffer进行洗脱,产物冻干后溶解在0.1% TFA水溶液中(v/v)。图A是反相HPLC(RP-HPLC)检测粗品蛋白质消化液的结果,图B是对洗脱液(纯化出了磷酸肽)的检测,图C是对去磷酸化样品洗脱液的检测。洗脱的组分使用XTerra RP18 柱 (5 μm,4.6 x 150 mm) 经RP-HPLC进行分离, 在215 nm进行紫外检测 (溶剂A: 0.1% TFA 水溶液[v/v],溶液B: 0.1% TFA乙腈溶液 [v/v]). 对图B中收集到的两个磷酸肽组分进行 MALDI分析。 |
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