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| ■ 产品简介 |
Capturem™ Protein G 系列产品是基于Protein G* 原理，结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱，特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem™ 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造，增加了膜孔表面积，对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小，可在室温下操作，纯化简单快速，可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量（miniprep）、中量（maxiprep）以及高通量（24 well、96 well）四种规格可供选择。
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*Protein G是来源于Staphylococcus aureus的细胞壁蛋白质，与许多物种（人、大小鼠等）的单克隆或多克隆IgG型抗体分子的Fc段有高亲和性。本制品使用的是重组protein G，去掉了白蛋白结合结构域、细胞壁和细胞膜结合结构域，从而提高了与抗体Fc片段的结合特异性。
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| ■ 产品特点 |
· 快速方便：从上样到洗脱，室温下操作小量纯化仅需5 min，无需上样后孵育
· 结合力强：膜与抗体的结合能力≥75 mg/cm3
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了抗体降解及失活，保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度：柱床体积小，带入污染少，可实现大体积洗涤，小体积洗脱
· 高灵活性：可从广泛来源的样品中纯化多种类型的抗体，如动物血清、腹水、细胞培养基等
· 一次性使用：有效减少样品间的交叉污染，单孔的纯化产量因样品类型、物种以及抗体同种型的不同而有所差别。
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注：Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（Code No. 635745/635744）经过优化，与旧版本产品（Code No. 635732）相比，收量更高
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| ■ Capturem™ 膜原理 |
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| ■ 操作流程 |
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| ■ 产品主要参数 |
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Capturem™ Protein G Miniprep |
Capturem™ Protein G Maxiprep |
Capturem™Protein G 24-Well Plate-HC |
Capturem™Protein G 96-Well Plate |
| 包装量 |
10次 |
6次 |
24 well |
96 well |
| 样品上样量*1 |
100～800 μl |
2～20 ml |
0.5～4.3 ml/well |
200～1,000 μl/well |
| 操作时长 |
5 min |
15 min |
15 min |
15 min |
| 收量*2 |
60 μg
protein/column |
1.2 mg
protein/column |
600 μg*3
protein/well |
60 μg
protein/well |
| 洗脱液使用量 |
100-300 μl |
0.5-1.5 ml |
1.8 ml |
100-300 μl |
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*1. 样品与binding buffer的稀释比例为1:2～1:15。建议杂交瘤样品1:2～1:4稀释，血清样品1:15稀释。
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*2. 收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型（isotype）。
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*3. 这是在HEK293细胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1时获得的收量。
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| ■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性 |
| Species |
Antibody subtype
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Protein A |
Protein G |
Protein A/G |
| Human |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG1 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG2 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG3 |
+ |
+++ |
+++ |
| lgG4 |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgM |
+ |
– |
+ |
| lgD |
– |
– |
– |
| lgA1 |
+ |
– |
+ |
| lgA2 |
+ |
– |
+ |
| Fab |
+ |
+ |
+ |
| scFv |
+ |
– |
+ |
| Mouse |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgM |
– |
– |
– |
| lgG1 |
+ |
++ |
++ |
| lgG2a |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG2b |
+++ |
+++ |
+++ |
| lgG3 |
+++ |
+++ |
+++ |
| Rat |
Total lgG |
+ |
++ |
++ |
| lgG1 |
+ |
++ |
++ |
| lgG2a |
– |
+++ |
+++ |
| lgG2b |
– |
+ |
+ |
| lgG2c |
+++ |
+++ |
+++ |
| Rabbit |
Total lgG |
+++ |
+++ |
+++ |
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+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
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| ■ 各试剂盒组成 |
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| Capturem™ Protein G Miniprep（635725） |
Miniprep Column 10个
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| Capturem™ Protein G Maxiprep（635727） |
Maxiprep Column 6个
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| Capturem™ Protein G 96-Well Plate（635726） |
96 well plate 1块
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| Capturem™ Protein G 24-Well Plate（635732） |
24 well plate 1块
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| Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635745） |
24 well plate 1块
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| Capturem™ Protein G 24-Well Plate-HC（635744） |
24 well plate 4块
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【注】由于Capturem Protein G系列产品不包含buffer和收集管，请按以下建议配制buffer和准备材料。
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1. 纯化buffer
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本制品可搭配使用磷酸盐、柠檬酸盐缓冲液等抗体纯化常用试剂。标准的buffer配方请参考说明书中内容，需要注意的是，buffer的盐浓度和pH值对纯化抗体的收量和纯度的影响会因抗体的同种型不同而不同。
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2. 收集tube/plate
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使用Miniprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个2 ml tube
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使用Maxiprep产品进行1次纯化，需要额外准备4个50 ml tube
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使用96 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个96 well collection plate
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使用24 well产品进行1次纯化，需要额外准备4个24 well collection plate
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