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| ■ 产品简介 |
Capturem™ Streptavidin——利用链霉亲和素快速富集和纯化生物素化物质。
链霉亲和素是一种来源于链霉菌Streptomyces avidinii的细胞壁蛋白质，与生物素有非常强的亲和力，这一互作特性在生命科学领域被广泛应用于富集等相关研究。Capturem™ Streptavidin mini 纯化柱和96-well 纯化板是将链霉亲和素固定在高容量的Capturem膜上，从而在室温条件下就可以对生物素化的靶标实现快速、高质量的纯化和富集，整个操作从上样到洗脱仅需5～15分钟。此外，还可以利用Capturem™ Streptavidin来捕获或pull down靶标分子或复合物。
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| ■ 产品特点 |
· 简单、快速的操作流程：室温下操作即可，小量纯化仅需5 min，96-well板仅需15 min
· 产物浓度高：少量的洗脱液即可实现高浓度洗脱
· 高质量：样品停留时间短，从而有效地防止了样品聚集、失活，或者样品中复合物解离
· 高重复性：每个纯化柱的纯化结果有高度的一致性
· 一次性使用：新型膜技术搭配一次性离心柱有效降低了污染和残留的风险
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| ■ 应用 |
· 生物素化蛋白质的纯化或富集
· Pull down与生物素化的配体相结合的蛋白质或oligo
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| Capturem Streptavidin对不同样品的载量和操作时间 |
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生物素标记的抗体 |
生物素标记的BSA |
生物素标记的ssDNA |
游离的生物素 |
纯化时间 |
| Capturem Streptavidin mini纯化柱和96-well 纯化板 |
20-40 μg |
>15 μg |
1,000-1,500 ng |
>4,000 pmol |
15 分钟 |
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| 实验例 |
例1
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使用Capturem Streptavidin连续三次捕获抗体。图A–C.首先将含48 μg生物素化兔IgG的Binding Buffer上样至平衡好的Capturem Streptavidin spin column中，这时32.0 ± 1.4 μg (图B)的抗体被成功固定在膜上。然后洗涤一次，再将使用Binding Buffer稀释的含20%小鼠血清且同时加入spiked-in靶抗体（约100 μg山羊抗兔抗体）的杂交瘤培养基加入到Capturem Streptavidin spin column中，分别使用Binding Buffer和PBS先后洗涤两次，最后使用1.0 M甘氨酸洗脱3次，从生物素化的捕捉抗体上洗脱获得高纯度的靶抗体，收量约为42 ± 5 μg (图C)。
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| 例2 |
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| Capturem Streptavidin 96-well纯化板具有高度重复性。分别对生物素化oligo（图A）和生物素化BSA（图B）进行8次技术重复上样，并使用离心的方法进行靶标捕获。通过测定样品上样前后的OD值来对结合的分子进行定量。捕获操作按照标准的流程进行，15 min之内完成。 |
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