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5’ …PumC(Nn)PumC…3’ |
*Pu: A or G, mC: 5-hydroxymethylcytosine, 5-methylcytosine, 4-methylcytosine, n=40-2,000 |
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■ 附带试剂 |
10X McrBC Buffer |
500 μl |
0.1% BSA |
1 ml |
100 mM GTP(100 ×) |
50 μl |
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■ 制品说明 |
McrBC是一种作用于含有甲基胞嘧啶DNA的特异性核酸内切酶,不作用于非甲基化DNA。它能够特异性地识别和切割包含两个(G/A)mC间距在40 bp-2000 bp的DNA序列。(G/A)mC中的甲基化胞嘧啶可以是5-羟甲基胞嘧啶, 5-甲基胞嘧啶或4-甲基胞嘧啶。 |
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■ 起 源 |
大肠杆菌表达的重组体蛋白质。 |
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■ 反应温度 |
37℃ |
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■ 活性确认 |
在50 μl反应液中,37℃下反应1小时,将0.25 μg的含有单一McrBC酶切位点的线型pBR322 (pBR322-mu-BamH I-M Alu I) 完全分解,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。 |
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■ 用途 |
DNA甲基化位点解析 (qAMP:应用Real Time PCR方法定量解析DNA甲基化位点) 。 富集非甲基化DNA (CHARM:Comprehensive high-throughput arrays for relative methylation, Genome Res. 2008 May;18(5):780-90. Epub 2008 Mar 3.) |
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