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| Cas9蛋白质检测抗体 |
· 重组Cas9蛋白质检测用单克隆抗体/多克隆抗体
· 多克隆抗体可识别野生型Cas9蛋白质和切口酶突变体（单克隆抗体还未进行测验）
· 高特异性：检测哺乳动物细胞裂解液样品时背景很低
· 高灵敏度：这两种抗体均可检测低于1 ng的重组Cas9蛋白质
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| ■ 产品说明： |
Takara Bio提供的单克隆抗体和多克隆抗体可用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质。
Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1)是以Streptococcus pyogenes来源的全长重组Cas9蛋白质为抗原，采用杂交瘤细胞制备生产的小鼠源抗体。用于Western blot检测时，此抗体可以识别细菌和哺乳动物细胞裂解液样品中低于1 ng的重组Cas9蛋白质。
Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody是用于检测Streptococcus pyogenes来源的重组Cas9蛋白质的兔源抗体。此抗体可以识别Cas9核酸酶的3种突变体：野生型Cas9蛋白质、Cas9切口酶和Cas9核酸酶-缺陷型突变体。此抗体具备高特异性和高灵敏度，检测哺乳动物细胞样品时其背景很低，用于Western blot检测时可识别低至0.5 ng的重组Cas9蛋白质。
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图1． Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测灵敏度
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0.15-20.0 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody(1:1,000稀释)进行Western Blot检测。采用HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
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Lane 1：HT1080細胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 6：rCas9 protein 1.25 ng
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Lane 2：HEK293細胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 7：rCas9 protein 2.5 ng
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Lane 3：rCas9 protein 0.15 ng
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Lane 8：rCas9 protein 5.0 ng
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Lane 4：rCas9 protein 0.30 ng
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Lane 9：rCas9 protein 10.0 ng
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Lane 5：rCas9 protein 0.625 ng
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Lane 10：rCas9 protein 20.0 ng
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| 图2．Western blot评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性 |
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制备多种未转染细胞和表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞（CMV启动子）的细胞裂解液，以细胞裂解液为样品通过Western blot方法评估Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody检测特异性。1 ng重组Cas9蛋白质（rCas9）作为阳性对照。Guide-it Cas9 Polyclonal Antibody (1:1,000稀释)作为一抗，HRP-conjugated goat anti-rabbit secondary antibody（1:5,000 稀释）作为二抗，ECL作为检测试剂。
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Lane 1：HepG2细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 8：裂解缓冲液
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Lane 2：CHO-K1细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 9：rCas9 protein 1 ng
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Lane 3：HeLa细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 10：Cas9表达HEK293细胞裂解液（2.0×103 cells）
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Lane 4：MCF7细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 11：Cas9表达HEK293细胞裂解液（5.0×103 cells）
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Lane 5：HEK293细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 12：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.0×104 cells）
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Lane 6：HT1080细胞裂解液（3.5×104 cells）
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Lane 13：Cas9表达HEK293细胞裂解液（1.5×104 cells）
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Lane 7：NIH3T3细胞裂解液（3.5×104 cells）
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| 图3. Western blot评估Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1) 检测灵敏度 |
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A. 1～5 ng重组Cas9蛋白质(rCas9）电泳后采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
B. 以表达Cas9重组蛋白质的HEK 293细胞的细胞裂解液为样品，采用Guide-it Cas9 Monoclonal Antibody (Clone TG8C1）（1：3,000稀释）进行Western Blot检测。HT1080、HEK293细胞裂解液作为阴性对照。
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| ■ 保存 |
－20℃
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| ■ 用途 |
| Western blot（1：1,000～1：5,000稀释） |
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