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■ 制品内容 (25 μl反应×50 次量) |
2×Premix for Porcine*1 |
650 μl |
Primer Mix for Porcine*2 |
50 μl |
Probe Mix for Porcine*3 |
50 μl |
dH2O |
1 ml |
Control DNA for Porcine (10 ng/μl) |
15 μl |
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*1 2×Premix For Porcine中含有反应用dNTP Mixture、Buffer、酶等。 *2 Primer Mix for Porcine中含有扩增用引物及内参照(Internal Control)。 *3 Probe Mix for Porcine中含有检测用探针,须避光保存。 |
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■ 制品说明 |
本制品是利用Real Time PCR技术快速检测猪*基因组DNA的试剂盒。采用双标记荧光PCR技术,根据线粒体DNA cytochrome c oxidase subunit I (COX I) 基因上动物种间多态性的差异进行猪源性成分鉴定。应用多色荧光检测技术,对反应液中含有的两种不同荧光染料进行双通道同步检测,在同一反应管内对猪的COX I基因及内参照 (Internal Control) 反应同时进行扩增,并通过标记两种不同荧光物质 (FAM、HEX) 的特异性探针进行特异性杂交,实现多色荧光同步检测。其中对内参照反应的检测,可以监控反应是否正常进行,防止假阴性结果。制品中2X Premix for Porcine已经将DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTP等试剂预混在一起。进行实验时,PCR反应液的配制十分简单。PCR反应用DNA聚合酶使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高了PCR的扩增效率。本检测无需电泳,简单快速。本制品适用于食品、化妆品和饲料等样品中猪源性成分的鉴别。 本试剂盒(原Code No. D320)为《SN/T 2051-2008食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法实时PCR法》附录D所述试剂盒。 |
*:本制品经验证可对常见猪的品种进行检出,如家猪(Sus scrofa domesticus)等,但由于检测品种不同,扩增序列可能存在变异,因此某些品种的猪可能无法被检出。 |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 注意事项 |
1. 本试剂盒检测灵敏度高,为了防止污染,实验要分区操作。 ① 第一区:反应液配制区。 ② 第二区:样品制备区。 ③ 第三区:样品添加区及反应检测区。 三个区之间必须进行物理性隔离, 避免人为因素造成污染。 2. 2×Premix for Porcine制品融解后,请上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经轻微离心后使用。 3. Probe Mix for Porcine应避光保存。 4. 配制Real Time PCR反应液时应避免强光照射。 5. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。 |
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